[實用新型]一種植物芽生長點微創(chuàng)轉(zhuǎn)基因刷

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200920103245.1
• 申請日: 2009-06-12
• 公開（公告）號: CN201459148U
• 公開（公告）日: 2010-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王海波;張艷敏;任志恒;董福雙;楊帆;瑞扎克;趙和;柴建方;徐顯;呂孟雨;溫之雨;孫果忠;梁新朝;左文博
• 申請（專利權(quán)）人: 河北省農(nóng)林科學(xué)院遺傳生理研究所
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/85;C12Q1/70
• 代理公司: 石家莊匯科專利商標事務(wù)所 13115
• 代理人: 王琪;張梅申

技術(shù)領(lǐng)域

本實用新型涉及一種植物轉(zhuǎn)基因工具，屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

關(guān)于植物轉(zhuǎn)基因的方法，雖已有很多報道，但比較可靠的只有基因槍法和農(nóng)桿菌法。目前對于大多數(shù)植物來說，轉(zhuǎn)基因仍然是一種相當(dāng)繁瑣、復(fù)雜的工作，而且效率低、效果不穩(wěn)。例如小麥的轉(zhuǎn)基因，轉(zhuǎn)化率僅有0.14％～4.3％(農(nóng)桿菌法)和0～6.46％(基因槍法)，且大多數(shù)情況下低于0.5％。基因槍法是比較受人青睞的方法之一，但不能保障每次都能打出結(jié)果，打入的目的基因常常是多拷貝整合，打槍過程容易造成目的基因的損傷，耗費高。農(nóng)桿菌法是目前人們用得最廣的方法之一，不僅轉(zhuǎn)入的基因多為單拷貝，還可以實現(xiàn)較大片段的轉(zhuǎn)化。但農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵是：首先要對受體細胞進行創(chuàng)傷。文獻報道的創(chuàng)傷方法有刀劃、針刺、基因槍轟擊，以及超聲波、離子束、碎碳化硅纖維液體震蕩處理等，但對大多數(shù)植物都效果不佳。而且目前通行的轉(zhuǎn)基因方法大都離不開組織培養(yǎng)和抗性標記篩選，由此也導(dǎo)致了一系列的問題，如受基因型限制、過分依賴抗性篩選等。植物“芽生長點”是一種理想的轉(zhuǎn)化受體，特別是用農(nóng)桿菌法進行轉(zhuǎn)化時可不依賴離體培養(yǎng)等復(fù)雜程序，極有發(fā)展前景，但關(guān)鍵是需要有對生長點能夠進行充分、有效的微創(chuàng)傷的技術(shù)。關(guān)于植物生長點的創(chuàng)傷，人們嘗試了針刺、刀劃等方法，但效果不好，轉(zhuǎn)化效果不佳。研制出解決上述問題的新的工具是當(dāng)前的迫切需求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種新型的植物轉(zhuǎn)基因工具——一種植物芽生長點微創(chuàng)轉(zhuǎn)基因刷(以下簡稱轉(zhuǎn)基因刷)。其主要用途是對植物芽生長點實施充分、有效的微創(chuàng)傷，以提高轉(zhuǎn)基因的效果，可通過蘸帶有目的基因的農(nóng)桿菌菌液刷刺植物生長點將微創(chuàng)傷和轉(zhuǎn)化處理一次完成。本實用新型還可用于開展動物轉(zhuǎn)基因和病毒學(xué)方面的研究。

本實用新型的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的：一種植物芽生長點微創(chuàng)轉(zhuǎn)基因刷，由刷頭、刷柄兩部分組成，其特征在于：所述的刷頭由刷毛束、刷毛脖、刷座、刷座螺栓依次連接組成，刷毛束前端為平頭或凹面結(jié)構(gòu)。

所述的植物芽生長點微創(chuàng)轉(zhuǎn)基因刷，其特征在于：所述的刷柄為帶有螺母連接口的手柄桿，刷頭與刷柄通過螺栓連接。

所述的植物芽生長點微創(chuàng)轉(zhuǎn)基因刷，其特征在于：所述的刷毛束后端包裹于金屬薄管內(nèi)形成刷毛脖，刷毛脖鑲嵌于刷座上，刷毛束露出刷毛脖的長度為1～5毫米。

所述的植物芽生長點微創(chuàng)轉(zhuǎn)基因刷，其特征在于：刷毛束單根纖維的直徑范圍為2～99微米。

所述的植物芽生長點微創(chuàng)轉(zhuǎn)基因刷，其特征在于：刷毛脖直徑為0.2～2.0毫米，露出刷座的長度0.5～2毫米。

所述的植物芽生長點微創(chuàng)轉(zhuǎn)基因刷，其特征在于：刷毛束纖維根數(shù)為50～5000。

本實用新型的技術(shù)方案，可以形成一種重要的、新一代的轉(zhuǎn)基因工具，適用于所有可形成芽生長點的植物，可使轉(zhuǎn)基因不再需要離體培養(yǎng)，不再受基因型的限制，不需要抗性標記篩選，操作過程簡便易行，轉(zhuǎn)化效率高。

附圖說明

下面結(jié)合附圖和實施例對本實用新型進一步說明

圖1所示本實用新型的結(jié)構(gòu)示意圖

圖中1.刷頭，1.1刷毛束，1.2刷毛脖，1.3刷座，1.4刷座螺栓，2.刷柄，2.1螺母連接口，2.2手柄桿。

具體實施方式

由圖1所示，本實用新型的刷頭1由刷毛束1.1、刷毛脖1.2、刷座1.3、刷座螺栓1.4依次連接組成；刷柄是帶有螺母連接口2.1的手柄桿2.2，將刷頭1和刷柄2兩部分螺旋連接。

圖1所示刷毛束1.1的單根纖維直徑2～99微米，刷毛纖維根數(shù)50～5000，刷毛束1.1露出刷毛脖1.2的長度為1～5毫米。圖1所示本實用新型因刷毛束單根纖維的直徑、根數(shù)和材料的不同形成系列化的刷頭，刷頭可更換與刷柄配合使用，刷毛束1.1可由不銹鋼或銅或玻璃或碳纖維制成。

本實用新型列舉的實施例旨在更進一步地闡明這種轉(zhuǎn)基因刷的組合及應(yīng)用方式，而不對本實用新型的范圍構(gòu)成任何限制。