[發明專利]歐美楊組織培養獲得再生植株的方法

無效

• 申請號: 200910311186.1
• 申請日: 2009-12-10
• 公開（公告）號: CN101715731A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發明（設計）人: 周洲;李永麗;陳迪新;陳雙臣;劉愛榮
• 申請（專利權）人: 河南科技大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 陳浩

1.歐美楊組織培養獲得再生植株的方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟

⑴無菌外植體的獲得：以歐美楊健康嫩枝為材料，將葉柄清洗消毒獲得無菌葉柄外植體；

⑵愈傷組織的誘導分化：將無菌葉柄接種于誘導培養基上，兩周后開始分化出大量不定芽，14-20天繼代培養一次；

⑶抽莖及壯苗：將叢生芽連同外植體轉接到抽莖培養基上，抽莖培養至叢生芽高于2cm后，將叢生苗轉移至壯苗培養基上，使叢生苗生長為莖干健壯的無根苗；

⑷生根培養：將無根苗單株接種到生根培養基中，培養獲得主根粗壯，側根豐富的幼苗；

所述的誘導培養基為MS+TDZ?0.025-0.1mg/L+6-BA?0.025-0.1mg/L+NAA?0.02-0.1mg/L+蔗糖20-40g/L；抽莖培養基為MS+KT?0.5-1mg/L+GA₃?1-4mg/L+果糖20-40g/L；壯苗培養基不含植物激素的MS+蔗糖20-40g/L；生根培養基：1/2MS+IBA?0.02-0.1mg/L+IAA?0.02-0.1mg/L+活性炭1-5mg/L+蔗糖20-40g/L。

2.根據權利要求1所述的歐美楊組織培養獲得再生植株的方法，其特征在于：所述培養基均含4-6g/L的瓊脂，pH值為5.6-6.2。

3.根據權利要求1所述的歐美楊組織培養獲得再生植株的方法，其特征在于：所述的組織培養的培養溫度應控制在24-26℃，光照強度為1500-2000lx，光照時間為12-16小時。

4.根據權利要求1所述的歐美楊組織培養獲得再生植株的方法，其特征在于：所述的葉柄清洗消毒的方法包括葉柄于流動的自來水下沖洗后，置于超凈工作臺中用70%-75%乙醇處理30-50s，無菌水沖洗除去殘留物；再用0.5-1g/L氯化汞溶液消毒3-6min，最后用無菌水沖洗除去殘留物，獲得無菌葉柄外植體。