[發明專利]高效去除水體中亞硝態氮、硝態氮和氨氮的施氏假單胞菌CY003及其應用無效
| 申請號: | 200910273368.4 | 申請日: | 2009-12-24 |
| 公開(公告)號: | CN101724594A | 公開(公告)日: | 2010-06-09 |
| 發明(設計)人: | 袁科平;李谷;鄒世平;艾曉輝;何力;鄭衛東 | 申請(專利權)人: | 中國水產科學研究院長江水產研究所 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12Q1/04;C02F3/34;C02F3/02;C12R1/38 |
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| 地址: | 434100 湖*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 高效 去除 水體 中亞 硝態氮 施氏假單胞菌 cy003 及其 應用 | ||
1.一種能去除水體中的氨態氮、硝態氮和亞硝態氮的施氏假單胞菌(Pseudomonasstutzeri)CY003,保藏在中國典型培養物保藏中心,其保藏編號為(CCTCC?NO):M?209196。
2.一種高效篩選反硝化菌的方法,包括下列步驟:
(1)、微生物選擇富集培養:
將水樣靜置棄去上清液,取池塘污泥接種于加杜氏小管的試管中(反硝化培養基),接種量為1~5%,在20~35℃溫箱中培養2~3d,將其觀察杜氏小管中是否有氣體產生;對于把產氣的試管,基本可以確定基本沒有所需菌株。
(2)、取產氣的試管,從中吸取0.1ml,梯度稀釋至合適濃度,涂布在BTB固體培養基平板中,30℃溫箱中培養2~3d,平板倒置;
(3)、從BTB培養基固體培養基中挑取藍色單菌落,接種于反硝化硝化培養基液體培養基中,接種量5~10%,在30~35℃、120~180rpm的條件下恒溫振蕩培育2~3d,測定硝酸鹽,亞硝酸鹽的含量。硝態氮基本消耗的培養液,即為目的菌株。
(4)、取所篩目的菌株連續轉接10代,測定其反硝化,確定是否遺傳穩定,遺產穩定即為所需。
反硝化培養基:硝酸鉀2.0g、七水合硫酸鎂0.2g、磷酸氫二鉀0.5g、酒石酸鉀鈉20g、蒸餾水1L、pH7.2(加20g瓊脂即為固體培養基),121℃濕熱滅菌30分鐘。
BTB篩選培養基:L-天冬酰胺酸1g、KNO3(或者NaNO2)1g、KH2PO4?1g、琥珀酸鈉8.5g、FeCl2.6H2O?0.05g、CaCl2.2H2O?0.2g、MgSO4.7H2O?0.07g、1ml/L?BTB[pH指示劑溴百里酚](1%,溶于乙醇),瓊脂20g、pH?7.0~7.2。
3.權利要求1所述的菌株在水產養殖水體、景觀水體和工業生活污水凈化中的應用。
4.權利要求2所述的應用,其中包括水體中去除氨態氮、硝態氮及亞硝態氮中的應用。
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