[發明專利]一種載有基因的磷酸鈣復合納米粒及其制法與用途

有效

• 申請號: 200910264114.6
• 申請日: 2009-12-30
• 公開（公告）號: CN101829330A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發明（設計）人: 余江南;曹霞;徐希明;蘇偉燕
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: A61K47/02
• 分類號: A61K47/02;A61K47/32;A61K48/00;C12N15/87
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 黃嘉棟

1.一種載有基因的磷酸鈣復合納米粒，其特征是：它是載有治療基因的磷酸鈣納米粒，該復合納米粒為球形，粒徑小于50nm。

2.根據權利要求1所述的載有基因的磷酸鈣復合納米粒，其特征是：所述的基因質粒是TGF-β1。

3.一種權利要求1所述的載有基因的磷酸鈣復合納米粒的制備方法，其特征是：它是將0.1M?Igepal?CO-520溶于25ml環己烷，加入1.36M氯化鈣，攪拌混勻形成微乳1；將0.1M?Igepal?CO-520，50μlTis-HCL(pH?7.4)溶于25ml環己烷，加入磷酸氫二鈉和基因質粒，加入磷酸氫二鈉的質量0.35M，磷酸氫二鈉與質粒的質量比為0.1∶1～10∶1，攪拌形成微乳2，將微乳2緩慢滴加到微乳1中，攪拌10min，形成載有基因的磷酸鈣復合納米粒的乳液。

4.一種權利要求1所述的載有基因的磷酸鈣復合納米粒的分離方法，它由如下步驟組成：

(1)層析柱的預處理：

取90g硅球加入含有0.336mL氨基丙基三乙氧基硅烷(aminopropyltriethoxysilane，APS)，1.5mL冰乙酸，7.5μL雙蒸水的150mL乙醇溶液中，攪拌過夜，70℃烘干備用；

(2)載有基因的磷酸鈣復合納米粒的分離：

將權利要求2制得的載有基因的磷酸鈣復合納米粒乳液過步驟(1)預處理的硅膠層析柱，先用無水乙醇洗脫環己烷及游離的質粒和鹽，然后用含有5×10^-4mol/LNaCl的70％乙醇溶液洗脫載基因的磷酸鈣復合納米粒；

(3)載基因的磷酸鈣復合納米粒乙醇液的濃縮：

將步驟(2)所得的含有載基因的磷酸鈣復合納米粒的乙醇液在37℃旋轉減壓蒸發6h除去乙醇，濃縮液置于12KD的透析袋中，置于磷酸鹽緩沖液中，4℃透析過夜，即得到載基因的磷酸鈣復合納米粒。

5.根據權利要求1所述的載基因的磷酸鈣復合納米粒在干細胞傳遞中應用。