[發明專利]一種產腸毒素性大腸桿菌ETEC-K99的噬菌體EK99-C及其應用

無效

• 申請號: 200910263295.0
• 申請日: 2009-12-18
• 公開（公告）號: CN101724607A
• 公開（公告）日: 2010-06-09
• 發明（設計）人: 王冉;張輝;包紅朵;魏瑞成
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K35/76;A61P1/12;A61P31/04;A61L2/00;A61L9/00;A61L101/52
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌

發明領域

本發明涉及一種噬菌體，特別涉及一種產腸毒素性大腸桿菌K99(ETEC-K99)的強裂解性噬菌體EK99-C，其分離物及其單一或混合使用在治療幼畜腹瀉、抗細菌感染以及環境凈化殺菌方面的應用。?

發明背景?

產腸毒素性大腸桿菌(Enterotoxigenic?E.coli，ETEC)是幼齡動物(仔豬、犢牛、羔羊等)腹瀉中常見而且重要的致病菌之一，此類大腸桿菌能借助于其所產生的菌毛抗原粘附于動物的小腸黏膜上，定居并產生腸毒素，從而呈現出致病作用。大腸桿菌致病力主要由黏附素性菌毛和腸毒素兩類毒力因子構成。目前在各種動物中已發現并展開研究的大腸桿菌菌毛抗原主要有：K88(F4)、K99(F5)、987P(F6)、F41及F17等。在引起初生仔豬、羔羊和犢牛腹瀉的腸毒素大腸桿菌中，K99是常見的粘附素，這些細菌表面纖毛能與小腸黏膜上皮細胞表面的特異性受體位點結合，使細菌吸附于腸黏膜表面并產生腸毒素，導致急性腹瀉、脫水，最后衰竭死亡。?

K99粘附素是Smith等1972年從腹瀉犢牛和羔羊中分離到的，定居于牛、羊、豬小腸中后段，是導致幼畜腹瀉的主要元兇：在新生仔豬大腸桿菌引起的腹瀉中，由大腸桿菌-K99引起的占30％以上；在初生羔羊中導致腹瀉發病率高達35％，死亡率47％左右；犢牛腹瀉是在生后0～3天感染毒性大腸桿菌而發病，一旦發病，80％就會死亡。可見，腸毒素性大腸桿菌感染幼畜導致動物急性腹瀉，造成幼畜成活率低，大大影響了我國動物養殖的經濟效益。該腹瀉在養殖場發?病普遍、死亡率高，嚴重威脅了動物健康，阻礙了畜牧業的發展。每年此類疾病所帶來的經濟損失數以億計，各養殖場為預防和治療這些疾病，花費了大量的資金。?

而治療這類疾病最常用的方法是用抗生素治療，但隨著大量耐藥菌的出現，抗生素對各種細菌的抑菌效果已達不到預期的要求。盡管疫苗的開發給了大腸桿菌病治療新的希望，但效果不錯的進口疫苗價格昂貴，且由于大腸桿菌血清型較多，不同血清型抗原性不同，菌株之間缺乏完全保護，不能針對所有豬場流行的致病血清型，疫苗的應用存在很多局限性。?

因此，亟待研究開發一種新型的療法和產品，以解決和應對細菌對抗生素耐藥性問題，以控制細菌性感染疾病在動物間的感染和傳播。?

噬菌體作為一種新興的治療方法，已經越來越受到國內外科學家的關注，美國醫療機構在1999年的國際噬菌體會議上預測，在未來的3-5年內，美國醫院將使用噬菌體制劑治療抗生素無法控制的感染。?

噬菌體是一類細菌依賴性病毒，可以吞噬、侵染細菌，并在菌體內繁殖使細菌裂解而殺滅細菌。其被發現于1個世紀以前，但隨抗生素的發現，科學家幾乎停滯了對噬菌體的研究。現今，隨著細菌對抗生素抗藥性和耐藥菌株日益顯現，抗生素的無效性日益明顯，使得科學家又再度萌發了利用噬菌體來消滅病原菌的設想。?

噬菌體在溶解其特異性宿主細菌時十分有效，且殺死細菌的機制與抗生素不同，不易產生耐藥性和殘留，十分適合成為理想的“新作用模型”的新型抗菌劑，因此，各國研究機構都將其作為一種新型、天然、安全的防治細菌性疾病的生物殺菌劑而進行研究。?