[發明專利]一種提高發狀念珠藻野外栽培生長速率的方法

無效

• 申請號: 200910254527.6
• 申請日: 2009-12-25
• 公開（公告）號: CN101717726A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發明（設計）人: 陳雪峰;王岳;尹文翠
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 徐文權

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種提高發狀念珠藻野外栽培生 長速率的方法，適合在野外沙漠或荒漠上大規模培養發狀念珠藻。

背景技術

發狀念珠藻(Nostoc?flagelliforme)是一種陸生性藍細菌(藍藻)， 俗稱發菜，主要生長在干旱、半干旱地區的部分荒漠草原和荒漠地帶。發 狀念珠藻生長極為緩慢，自然條件下年生長率低于10％，蘊藏量相當有限。 長期以來，發狀念珠藻是我國一種名貴的食用藍藻。近年來發狀念珠藻市 場需求量的上升及其價格的上漲使得對發狀念珠藻的掠奪性采收加劇，發 狀念珠藻資源遭受嚴重破壞，以致瀕臨枯竭，并導致成片牧草枯死，大面 積土壤裸露，致使草場退化、沙化。在干旱少雨的特殊生態環境下，經過 幾十年上百年才能長成的灌木植被一經破壞就基本上沒有恢復的可能。鑒 于這一局面，國務院于2000年7月起發狀念珠藻被列為國家一級重點保 護植物，禁止其采收、加工和銷售。

為了能使野生發菜資源得到恢復，保護資源和環境，有關發狀念珠藻 的大規模栽培一直受到關注。至今為止，發菜細胞的液體培養條件已經比 較成熟，但有效的固體培養方法還很少。根據野外調查，發菜的生長環境 土壤貧瘠，土壤具有的共同特征是土層薄，沙性大，結構松散。這種土壤 環境只有發菜能夠生長，但生長緩慢，說明特殊的微土壤環境是發菜局限 分布的一個主要因子。至今為止，關于發狀念珠藻的固體培養還僅僅停留 在發菜原植體的栽培上，但自2000年起發菜列為禁止采收的植物后，尋 求一種新的有效的發菜野外栽培方法就顯得極為重要。

發明內容

本發明的目的在于提供一種更為簡便、高效，適合大規模培養的提高 發狀念珠藻野外栽培生長速率的方法。

為達到上述目的，本發明采用的技術方案是：

1)制備發狀念珠藻單細胞接種液：將發狀念珠藻細胞經分離純化后 得到發狀念珠藻單細胞，發狀念珠藻液體擴大培養條件為，光照強度 90μmolm^-2s^-1，光暗比12∶12，有光照時溫度25℃，無光照時10℃，在 BG-11₀培養液中培養15-20天得到發狀念珠藻菌體，將所得發狀念珠藻菌 體接種于含有質量濃度為0.01％-0.5％親水性多糖的BG-11₀培養基中，其吸 光度A₄₁₀＝0.4-0.8，即制成發狀念珠藻單細胞接種菌源；

2)發狀念珠藻單細胞在野外沙漠或荒漠上的培養：將發狀念珠藻單 細胞接種菌源噴灑于野外沙漠或荒漠上，每日早晨噴灑一次水分，噴灑的 水分使固體基質表面濕潤即可，直至30天后，發狀念珠藻形成肉眼可見 的小群落即可停止每天噴灑水分，改為每隔5天噴灑水分，60天后小群落 逐漸連接成片，停止灑水任其自然生長。

本發明的親水性多糖為阿拉伯膠、果膠、羧甲基纖維素、黃原膠或海 藻酸鈉。

本發明通過添加親水性胞外多糖來調節發狀念珠藻細胞與沙粒的潤 濕性，提高發狀念珠藻在沙漠或荒漠上的生長速率。在沙漠或荒漠上，沙 粒本身雖具有一定的潤濕性能，但并不是最佳的，添加親水性的胞外多糖 可使發狀念珠藍細胞與固體依附材料之間的潤濕性能達到更好，更適合發 狀念珠藻在固體材料上的生長。經過一定時間的野外培養，發狀念珠藻細 胞群落逐漸增多和增大，并通過自身代謝分泌胞外多糖與沙粒粘結形成生 物結皮，提高了發狀念珠藻在荒漠治理中的生態保護作用。

具體實施方式

實施例1：1)制備發狀念珠藻單細胞接種液：將發狀念珠藻細胞經分 離純化后得到發狀念珠藻單細胞，發狀念珠藻液體擴大培養條件為，光照 強度90μmolm^-2s^-1，光暗比12∶12，有光照時溫度25℃，無光照時10℃， 在BG-11₀培養液中培養15-20天得到發狀念珠藻菌體，將所得發狀念珠藻 菌體接種于含有質量濃度為0.01％阿拉伯膠的BG-11₀培養基中，其吸光度 A₄₁₀＝0.4，即制成發狀念珠藻單細胞接種菌源；