[發明專利]一種依巴斯汀有關物質的分析方法

有效

• 申請號: 200910249694.1
• 申請日: 2009-12-14
• 公開（公告）號: CN102095808A
• 公開（公告）日: 2011-06-15
• 發明（設計）人: 肖玲;孫小路
• 申請（專利權）人: 重慶華邦制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/36;G01N30/06
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 范勇明

技術領域：

本發明涉及一種藥物的分析方法，特別是用高效液相色譜對依巴斯汀有關物質進行測定的方法。

背景技術：

在藥物分析中所稱的“有關物質(related?substances)”是指特定藥物中不是主要組成物，但與成份相關的物質。由于一種藥品從合成原料藥到制備有關的制劑，再經貯藏、運輸、使用，要經歷一段較為復雜和漫長的過程，在此期間，每一過程都有可能產生有關的物質，如生產中可能帶入起始原料、試劑、中間體、副產物和異構體等；在貯藏和運輸過程中，可能產生降解產物、聚合物或晶型轉變等特殊雜質。為保證藥物的安全有效，同時也要考慮到生產實際情況，因此，國內外對藥物的研究，可允許含有一定限量的無害或低毒性的有關物質，但對毒性較大，能危害人體健康的、無效的或能影響藥物穩定性的有關物質則必須嚴格控制。因此有關物質檢測是控制藥品質量的重要指標。

依巴斯汀(Ebastine)，化學名稱為：4-二苯基甲氧基1-[3(對-叔丁基苯甲酰基)丙基]嘧啶，是一種強效、長效、高選擇性的組胺H₁受體阻斷劑，被廣泛用于過敏性鼻炎等治療。

現有的依巴斯汀有關物質高效液相色譜分析方法(歐洲藥典6版)，測定很不方便，其分析時間周期過長，超過2個小時，流動相配置復雜。因此需要對測定條件進行探索改進，建立起一套快速、簡單，并且有效、可靠的成品反應監控及有關物質分析方法。

發明內容：

本發明的目的是探索依巴斯汀有關物質高效液相色譜分析的各種條件，提供一種快速、簡便、可靠、有效的依巴斯汀有關物質高效液相色譜分析方法。

本發明人經過對高效液相色譜分析中色譜柱、流動相等條件進行篩選，選用合適的緩沖溶液體系，并在流動相中加三乙胺掃尾，在流動相的比例調節上，充分兼顧成品中數十個雜質(包括EP登載雜質)分離的需要，最終建立了弱堿性的HPLC梯度洗脫方法，將分析周期控制在60分鐘內，能將數十個已知雜質與主峰基線分離，達到了上述發明目的。

本發明的技術方案如下：

依巴斯汀中有關物質的高效液相色譜分析方法，其特征為：

采用反相高效液相色譜法，色譜柱填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，采用有機溶劑和緩沖溶液為流動相，將待測樣品用有機溶劑配制成2.0～3.0mg/ml的樣品溶液，并采用梯度洗脫法洗脫；所述有機溶劑是甲醇或乙腈；所述緩沖溶液是三乙胺水溶液。

優選的檢測條件是：所述三乙胺水溶液中三乙胺濃度為0.05％～1.0％(V/V)，并用鹽或酸調節至pH值為6.5～10.8，所述鹽選自磷酸鹽、醋酸鹽、甲酸鹽、六氟磷酸鉀中的一種或幾種。所述酸選自磷酸、醋酸、甲酸中的一種或幾種。

并可選用以下檢測條件，樣品檢測波長：210～250nm，流速：0.8～1.3ml/min，柱溫：15～35℃，進樣量：10μl；

本發明方法與歐洲藥典方法的測定結果對比如下：

采用本發明的原料藥依巴斯汀(4-二苯基甲氧基1-[3(對-叔丁基苯甲酰基)丙基]嘧啶)有關物質的高效液相色譜分析方法，其積極效果在于可以有效、快速、簡單、可靠測定依巴斯汀所有的有關物質。

附圖說明：

圖1：原料藥依巴斯汀歐洲藥典方法測定色譜圖；

圖2～圖17是用本發明方法對所有潛在雜質的混合測定色譜圖，其中測定條件為：

圖2：檢測波長250nm；

圖3：檢測波長210nm；

圖4：有機相為甲醇；

圖5：緩沖溶液使用磷酸鹽；

圖6：緩沖溶液使用六氟磷酸鉀；

圖7：緩沖溶液使用醋酸鹽；

圖8：緩沖溶液pH值＝6.5；

圖9：緩沖溶液pH值＝10.8；

圖10：緩沖溶液三乙胺濃度0.05％；

圖11：緩沖溶液三乙胺濃度1.0％；

圖12：流速0.8ml/min；

圖13：流速1.3ml/min；

圖14：柱溫15℃；圖15：柱溫35℃；

圖16：測樣濃度2.0mg/ml；

圖17：測樣濃度3.0mg/ml；

圖18：原料藥依巴斯汀中的潛在雜質A、C、B_1a、的定量限檢測色譜圖；

圖19：依巴斯汀原料中的潛在雜質B、D、E、X₂、X_2a、F、G的定量限檢測色譜圖。

所有圖中，各雜質代碼代表的雜質名稱見表1：

表1附圖中雜質代碼和名稱