[發明專利]一種與水稻抗旱性相關的OsRINGzf1蛋白編碼序列及其應用

有效

• 申請號: 200910247769.2
• 申請日: 2009-12-31
• 公開（公告）號: CN102115756A
• 公開（公告）日: 2011-07-06
• 發明（設計）人: 劉鴻艷;滕永勇;陳守俊;丁雪峰;羅利軍
• 申請（專利權）人: 上海市農業生物基因中心
• 主分類號: C12N15/52
• 分類號: C12N15/52;C12N9/00;C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/63;C12N1/19;C12N5/10;C12N15/82
• 代理公司: 上海百一領御專利代理事務所(普通合伙) 31243
• 代理人: 馬育麟

技術領域

本發明涉及一種蛋白編碼序列，具體地說，涉及一種與水稻抗旱性相關的OsRINGzf1蛋白編碼序列，屬于基因工程領域。

背景技術

水稻是農業生產中用水最多的作物，其節水抗旱性對我國的糧食、水和生態安全具有重要意義。利用基因工程這一分子育種技術，將抗旱基因轉入當前廣泛應用的優良水稻品種中，從而改良其抗旱性，培育即抗旱又高產優質的農作物新品種是抗旱育種的有效途徑之一。

發掘抗旱基因是抗旱分子育種的基礎。已發表的抗旱相關基因及其蛋白的研究越來越多。E3連接酶是參與泛素蛋白酶體途徑降解蛋白質的主要成員之一，主要參與細胞周期調控、信號轉導、細胞凋亡等過程，調控植物的生長發育。

近年來，在擬南芥中發現E3參與了逆境下的激素(ABA，烯，JA，SA等)信號傳導，調節植株的抗逆性。E3是一個大家族，可以分為單亞基E3和多亞基E3兩類，主要包含HECT，RING，U-BOX和PHD四種結構域。

單亞基RING(Really?Interesting?New?Gene)E3是一類含有RING-finger結構域的蛋白。RING?finger結構域是70個氨基酸中的8個氨基酸(胱氨酸和組氨酸)與鋅離子螯合作用形成C₃H₂C₃(RING-H2)或C₃H₁C₄(RING-HC)構型。E3的多樣性保證了靶蛋白識別的專一性。

發明內容

本發明的目的在于提供一種與水稻抗旱性相關的OsRINGzf1蛋白編碼序列、其核酸序列、含該蛋白編碼序列的載體及其宿主細胞。

本發明的另一目的是提供含有水稻OsRINGzf1蛋白編碼序列在利用轉基因技術改良植物抗旱中的應用。

為了實現本發明目的，本發明提供了一種與水稻抗旱性相關的OsRINGzf1蛋白編碼序列，包括：編碼具有水稻OsRINGzf1蛋白質活性的多肽的核苷酸序列，而且所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO.3中從核苷酸第227-790位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能與SEQ?ID?NO.3中從核苷酸第227-790位的核苷酸序列雜交。

較佳地，所述的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO.3所示的氨基酸序列的多肽，或其保守性變異多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。

更佳地，所述的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO.3中從核苷酸第227-790位的核苷酸序列。

本發明提供一種分離出的DNA分子，該分子包括：編碼具有水稻OsRINGzf1蛋白質活性的多肽的核苷酸序列，而且所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO.3中從核苷酸第227-790位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能與SEQ?ID?NO.3中從核苷酸第227-790位的核苷酸序列雜交。

本發明還提供了一種分離出的包含C₃H₂C₃型RING區域的E3連接酶相關蛋白質多肽OsRINGzf1，它包括：具有SEQ?ID?NO.3氨基酸序列的多肽。

較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO.3序列的多肽，該多肽能夠在鹽、旱、活性氧以及茉莉酸甲酯處理下均能發揮作用。

本發明還提供了一種載體，它包含上述的DNA分子。

一種核酸分子，它包含所述的DNA分子中8-100個連續核苷酸。

本發明還提供了一種用上述DNA分子轉化的宿主細胞，是真核細胞。

本發明在實例中所述宿主細胞是水稻。

在本發明中，“分離的”、“純化的”DNA是指，該DNA或片段已從天然狀態下位于其兩側的序列中分離出來，還指該DNA或片段已經與天然狀態下伴隨核酸的組分分開，而且已經與在細胞中伴隨其蛋白質分開。

在本發明中，術語“水稻抗旱蛋白(或多肽)編碼序列”指編碼具有水稻OsRINGzf1蛋白活性的多肽的核苷酸序列，如SEQ?ID?NO.3中第227-790位核苷酸序列及其簡并序列。該簡并序列是指，位于SEQ?ID?NO.3序列的編碼框第227-790位核苷酸中，有一個或多個密碼子被編碼相同氨基酸的簡并密碼子所取代后而產生的序列。由于密碼子的簡并性，所以與SEQ?ID?NO.3中第227-790位核苷酸序列同源性低至約70％的簡并序列也能編碼出SEQ?ID?NO.3所述的序列。