[發明專利]一種重組人p43蛋白生物學活性的檢測方法有效
| 申請號： | 200910247215.2 | 申請日： | 2009-12-28 |
| 公開（公告）號： | CN102109527A | 公開（公告）日： | 2011-06-29 |
| 發明（設計）人： | 胡立德;劉大濤;黃相紅;譚小釘 | 申請（專利權）人： | 上海信誼藥廠有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人： | 陳哲鋒 |
| 地址： | 201206*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 重組 p43 蛋白 生物學 活性 檢測 方法 | ||
1.一種測量重組人p43蛋白的生物學活性的方法，所述方法包括以下步驟：
(1)使重組人p43蛋白誘導小鼠單核巨噬細胞Raw264.7，產生TNFα；
(2)通過酶聯免疫法測定步驟(1)生成的TNFα含量；
(3)根據步驟(2)得到的TNFα含量得到重組人p43蛋白的生物學活性。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中的誘導方法包括用緩沖液梯度稀釋待測樣品，并作出不少于五個稀釋度，再將稀釋液分別與小鼠單核巨噬細胞混合孵育培養。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述緩沖液是無血清DMEM培養基。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶聯免疫法是雙抗夾心法。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)是根據《中華人民共和國藥典》2005年版三部和《生物技術藥物研究開發和質量控制》第二版進行的。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)如下進行：以p43濃度的對數值lgCp43為X值，以相應的TNF?α濃度為Y值，采用Nonlinear?regression曲線擬合，得到重組人p43蛋白的劑量-反應曲線，從而得到四參數分析結果。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，由所述步驟(3)得到的能誘導50％最大反應的重組人p43蛋白最高稀釋度的倒數作為活性值。
8.一種制備p43蛋白制品的方法，所述方法包括權利要求1所述的測量重組人p43蛋白的生物學活性的方法。
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