[發明專利]土鱉干粉水提物的制備及在醫學中的應用

有效

• 申請號: 200910246926.8
• 申請日: 2006-09-30
• 公開（公告）號: CN101822694A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發明（設計）人: 彭師奇;趙明;魏蕾;曹連甲;邵丹;耿承芳;葉發舜;廖銀根
• 申請（專利權）人: 浙江醫藥股份有限公司新昌制藥廠
• 主分類號: A61K35/64
• 分類號: A61K35/64;A61K38/10;A61P31/22;C07K7/08
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

本發明申請是申請號為“2006101401601”、申請日期為2006年9月30日、 發明名稱是“土鱉干粉水提物和酶解物的制備及在醫學中的應用”的發明申請的分 案申請。

技術領域

本發明涉及中藥材有效部位的制備工藝，尤其涉及土鱉干粉的有效部位制備工 藝，本發明還涉及從有效部位中分離得到的相關多肽、其氨基酸序列、其指紋圖譜 以及它們在治療帶狀皰疹中的應用，屬于生物醫藥領域。

背景技術

帶狀皰疹是常見的皮膚疾患，不僅波及大量人群，而且有些嚴重病例可致死亡。 1980年代初，江西省皮膚病專科醫院在皮膚病調研中，偶然發現單味土鱉蟲 (Eupolyphaga?Seu?Steleophaga；別名：地鱉、土鱉、過街、地烏龜、節節蟲、臭蟲 母；產地：湖南、湖北、江蘇)對帶狀皰疹有明確療效。此后，土鱉蟲干粉便作為 醫院制劑在江西省皮膚病專科醫院用于治療帶狀皰疹、水痘、單純皰疹和生殖器 皰疹等病毒感染性皮膚病。在接受治療的三萬多人次中，幾乎全部獲得了滿意的療 效。土鱉蟲干粉治療帶狀皰疹、水痘、單純皰疹和生殖器皰疹等病毒感染性皮膚 病的優點是療效好、見效快、治療時間短、副作用小；缺點是用量大，每日需服 2次，每次多達10克。這種大劑量的治療給病人帶來了明顯的不便。

發明內容

本發明依據江西省皮膚病專科醫院的院內制劑土鱉蟲干粉在治療帶狀皰疹、 水痘、單純皰疹和生殖器皰疹等病毒感染性皮膚病中顯示的療效好、見效快、治 療時間短和副作用小等優點，針對用量大給病人帶來不便的缺點，發明人依據土鱉 及土鱉干粉的蛋白質性質、蛋白質經口服進入胃可被胃蛋白酶降解為多肽的性質， 以及多肽的良好水溶性，推測土鱉及土鱉干粉的直接水提物和酶解物有可能在不減 弱治療效果的前提下減少服藥量。

本發明首先所要解決的技術問題是克服現有技術的不足，提供一種從土鱉蟲干 粉中提取治療帶狀皰疹有效部位的工藝以及由該工藝所得到的一系列多肽組分，包 括以下幾個方面：

土鱉蟲水提多肽粗粉的制備工藝以及所得到的水提多肽粗粉(W₀)；土鱉蟲水 提多肽粗粉的分離與純化工藝以及所得到的多肽組分(W_I、W_II、W_III和W_IV)；土 鱉蟲酶解多肽粗粉的制備工藝以及所得到的多肽組分(E₀)；土鱉蟲酶解多肽粗粉的 分離與純化工藝以及所得到的多肽組分(E_I、E_II和E_III)。

本發明首先所要解決的技術問題是通過以下技術方案來實現的：

1.土鱉水提多肽粗粉的制備工藝，包括：將土鱉干粉與蒸餾水按3∶100的比例 懸浮、37℃±3℃恒溫攪拌40分鐘、過濾、濾液冷凍干燥、得到的水提多肽粗粉(W₀) 4℃保存。

2.土鱉水提多肽粗粉的分離與純化工藝，包括：將水提多肽粗粉W₀與蒸餾水 按10∶1的比例溶解、10000轉離心10分鐘、上清液加載到Sephadex?G25層析柱上、 以0.005mol/L乙酸胺緩沖液洗脫(流速0.5mL/min，紫外檢測波長280nm)、收 集的餾份按峰合并、冷凍干燥、得到W_I、W_II、W_III和W_IV四種水提多肽組分。

3.土鱉酶解多肽粗粉的制備工藝，包括：將土鱉干粉與蒸餾水按1∶20的比例懸浮、 得到的懸浮液與模擬胃液(2.0gNaCl，3.2g胃蛋白酶，7ml濃HCl，雙蒸水定容于 1000ml，pH值為1.2)按1∶1的比例混合、37℃±3℃恒溫振蕩4小時、減壓過濾、濾 液用固體NaHCO₃調pH?7.0、3000轉離心5分鐘、收集上清液、冷凍干燥，得到的 酶解多肽粗品(E₀)4℃保存。