[發明專利]一種檢測馬杜霉素的方法及其專用酶聯免疫試劑盒

無效

• 申請號: 200910241303.1
• 申請日: 2009-11-27
• 公開（公告）號: CN102079789A
• 公開（公告）日: 2011-06-01
• 發明（設計）人: 吳小平;江海洋;史為民;徐飛;王戰輝;王奇昌;朱奎;潘凈如;王進
• 申請（專利權）人: 北京維德維康生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/44
• 分類號: C07K16/44;C12N5/20;C07H19/01;C07H1/00;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K14/47;G01N33/577
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種馬杜霉素單克隆抗體，是由保藏編號為CGMCC?No.3391的馬杜霉素單克隆抗體雜交瘤細胞株MAD分泌產生的。

2.保藏編號為CGMCC?No.3391的馬杜霉素單克隆抗體雜交瘤細胞株MAD。

3.一種化合物，其結構式如式I所示：

4.權利要求3所示化合物與載體蛋白的偶聯物；所述載體蛋白為鼠血清蛋白、甲狀腺蛋白、牛血清白蛋白、兔血清白蛋白、人血清白蛋白、卵清蛋白或血藍蛋白。

5.權利要求3所述化合物和/或權利要求4所述化合物與載體蛋白的偶聯物在制備馬杜霉素單克隆抗體中的應用。

6.權利要求3中所述化合物、權利要求4中所述偶聯物和/或權利要求1中所述馬杜霉素單克隆抗體在制備檢測馬杜霉素的酶聯免疫試劑盒中的應用。

7.一種檢測馬杜霉素的酶聯免疫試劑盒，為下述1)、2)、3)或4)中任一所述酶聯免疫試劑盒：

1)酶聯免疫試劑盒中包括權利要求4中所述偶聯物、權利要求1中所述馬杜霉素單克隆抗體和酶標記抗抗體；其中，所述偶聯物作為包被原；

2)酶聯免疫試劑盒中包括權利要求3中所述化合物的酶標記物、權利要求1中所述馬杜霉素單克隆抗體和抗抗體；其中，所述抗抗體作為包被原；

3)酶聯免疫試劑盒中包括權利要求3中所述化合物的酶標記物、權利要求1中所述馬杜霉素單克隆抗體；其中，所述馬杜霉素單克隆抗體作為包被原；

4)酶聯免疫試劑盒中包括權利要求4中所述偶聯物、權利要求1中所述馬杜霉素單克隆抗體的酶標記物；其中，所述偶聯物作為包被原。

8.一種檢測樣品中馬杜霉素的方法，包括如下步驟：

1)將待測樣品用提取劑進行提取，得到提取溶液，即為待測樣本溶液；

2)用權利要求7所述試劑盒對所述待測樣本溶液進行檢測；

所述提取劑為甲醇與氯化鈉的混合溶液；

所述待測樣品為動物肝臟或動物肌肉。

9.一種制備權利要求3中所述化合物的方法，包括如下步驟：將每100mg馬杜霉素胺，溶解于1mL二噁烷中；然后加入70μL無水三正丁胺，4℃冷卻，并攪拌15min；加入15μL重蒸的氯甲酸異丁酯，4℃攪拌30min，得到溶液I；稱取30mg對氨基苯甲酸溶于水中，調pH至9.0，得到溶液II；將溶液I逐滴加入到溶液II中，并于4℃攪拌4小時，得到權利要求3中所述化合物。

10.一種制備權利要求4中所述化合物與載體蛋白的偶聯物的方法，包括如下步驟：將100mg馬杜霉素胺，溶解于1mL二噁烷中；然后加入70μL無水三正丁胺，4℃冷卻，并攪拌15min；加入15μL重蒸的氯甲酸異丁酯，4℃攪拌30min，得到溶液I；稱取30mg對氨基苯甲酸溶于水中，調pH至9.0，得到溶液II；將溶液I逐滴加入到溶液II中，得到溶液III；

稱取50mg?1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和25mg?N-羥基硫代琥珀酰亞胺加入到所述溶液III中，攪拌混勻，25℃反應12小時，得到溶液IV；稱取載體蛋白50mg溶解于3mL碳酸溶液中，逐滴加入到溶液IV中，25℃繼續攪拌4h；透析，得到權利要求4中所述化合物與載體蛋白的偶聯物。