[發明專利]利用葉綠體制備狂犬病毒抗原的方法無效
| 申請號: | 200910238470.0 | 申請日: | 2009-11-20 |
| 公開(公告)號: | CN101812468A | 公開(公告)日: | 2010-08-25 |
| 發明(設計)人: | 李軼女;張志芳;胡英考;劉國憲;沈桂芳 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院生物技術研究所 |
| 主分類號: | C12N15/47 | 分類號: | C12N15/47;C12N15/63;C12N1/13;C07K14/145;A61K39/205;G01N33/569;A61P31/14;C12R1/89 |
| 代理公司: | 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139 | 代理人: | 孫皓晨;費碧華 |
| 地址: | 100081 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 利用 葉綠體 制備 狂犬病毒 抗原 方法 | ||
1.利用葉綠體制備狂犬病毒抗原的方法,包括(1)構建狂犬病毒抗原基因衣藻葉綠體表達載體;(2)將所構建的狂犬病毒抗原基因衣藻葉綠體表達載體轉化衣藻,篩選得到轉化有狂犬病毒抗原基因的轉基因衣藻;(3)培養轉基因衣藻,使狂犬病毒抗原基因在衣藻中表達,即得。
2.按照權利要求1所述的方法,其特征在于:所述狂犬病毒抗原基因包括狂犬病病毒抗原蛋白G基因或狂犬病病毒抗原蛋白N基因。
3.按照權利要求1所述的方法,其特征在于,所述的狂犬病毒抗原基因衣藻葉綠體表達載體主要按照以下方法構建得到:將狂犬病毒抗原基因與衣藻葉綠體特異啟動子和終止子組合成狂犬病毒抗原基因表達盒;將狂犬病毒抗原基因表達盒與衣藻葉綠體基因組中的同源片段進行連接,構建得到狂犬病毒抗原基因衣藻葉綠體特異表達載體。
4.按照權利要求3所述的方法,其特征在于:所述的葉綠體特異啟動子包括但不限于:atpA、atpB、psbA、psbD或rbcL;所述的終止子為rbcL終止子。
5.按照權利要求3所述的方法,其特征在于:所述的同源片段為SEQ?IDNo:3所示。
6.按照權利要求1、3、4或5所述的方法,其特征在于:所述的狂犬病毒抗原基因衣藻葉綠體表達載體還含有選擇標記基因;所述的選擇標記基因優選為細菌來源的抗菌素抗性基因,更優選為aadA基因。
7.權利要求1-5任何一項方法所制備得到的狂犬病毒抗原。
8.權利要求7所述的狂犬病毒抗原在制備預防或檢測狂犬病中的用途。
9.一種轉化有狂犬病毒抗原N基因的轉基因衣藻(Chlamydomonasreinhardtii),其微生物保藏號是:CGMCC?No.3423。
10.一種轉化有狂犬病毒抗原G基因的轉基因衣藻(Chlamydomonasreinhardtii),其微生物保藏號是:CGMCC?No.3424。
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