[發(fā)明專利]一種殼聚糖固定化蒜氨酸酶及制備大蒜素方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910236538.1
• 申請日: 2009-10-30
• 公開（公告）號: CN101696407A
• 公開（公告）日: 2010-04-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王靜;王成濤;曹雁平;孫寶國
• 申請（專利權(quán)）人: 北京工商大學(xué)
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C12P11/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用殼聚糖固定化蒜氨酸酶的方法，包括以下步驟：

a.殼聚糖微球的制備：將殼聚糖溶解在0.5％的醋酸溶液中，制成2％的殼聚糖溶液，用注射器將殼聚糖溶液滴加到含有10％的氫氧化鈉、95％乙醇溶液中，制成2-3mm左右的殼聚糖微球，用蒸餾水洗至中性，保存在蒸餾水中備用；

b.殼聚糖的交聯(lián)及微球載體的制備：取殼聚糖微球與0.5％-5％的戊二醛溶液反應(yīng)30-60min，用無水乙醇清洗數(shù)次，再用蒸餾水洗滌3-5次，真空抽濾干燥，得到殼聚糖微球載體，在4℃冰箱中封閉保存?zhèn)溆茫?/p>

c.蒜氨酸酶固定化：在4℃條件下，取制備好的殼聚糖微球載體加入一定量的蒜氨酸酶溶液中，中速搖床振蕩3-10h，取出后用蒸餾水洗去殘留的殼聚糖微球表面的酶，至沖洗液中無酶活性檢出，真空抽濾干燥，即得到固定化蒜氨酸酶，將此固定化酶浸于0.1mol/L?pH為6.5的磷酸緩沖液中，在4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

2.一種利用殼聚糖固定化蒜氨酸酶制備大蒜素的方法，其特征在于將權(quán)利要求1所述制備方法制備得到的固定化蒜氨酸酶固定于生物流化床反應(yīng)器內(nèi)連續(xù)循環(huán)式利用固定化蒜氨酸酶催化底物轉(zhuǎn)化生成大蒜素。