[發明專利]一種提高聚乳酸類微球對水溶性蛋白包封率的方法

無效

• 申請號: 200910235781.1
• 申請日: 2009-10-15
• 公開（公告）號: CN101693111A
• 公開（公告）日: 2010-04-14
• 發明（設計）人: 蔣國強;李近;孫佳麗;丁富新
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;A61K47/34;A61K9/19;A61K38/00
• 代理公司: 北京市立方律師事務所 11330
• 代理人: 張磊

技術領域

一種提高聚乳酸類微球對水溶性蛋白包封率的方法，確切的說是一種通過改進復乳法(W/O/W)制備聚乳酸類微粒，提高對水溶性蛋白包封率的方法，屬于藥物制劑領域。

背景技術

可生物降解材料的載藥微球，可通過對釋藥速率的控制或靶向作用來顯著提高臨床用藥的安全性和有效性，適用于多種給藥方式和給藥途徑。聚乳酸類成球材料，包括聚乳酸PLA、乳酸/羥基乙酸共聚物PLGA及兩者的衍生物等，是迄今為止國內外研究最多、應用最廣的可生物降解的合成高分子材料。PLA、PLGA等聚乳酸類材料目前被公認為良好的可生物降解的控釋骨架具有良好的生物相容性，不會引起明顯炎癥反應、免疫反應和細胞毒性反應，已獲美國FDA批準。采用聚乳酸類材料如PLA、PLGA作為載藥微球、納米粒的載體，可以起到保護藥物、增溶、提高生物利用度的作用，尤其適用于目前研究開發較多的多肽、疫苗、激素等生物大分子藥物。此類藥物經PLA或PLGA包埋制備成緩釋微球注射劑，可有效拓寬給藥途徑，提高藥物的生物利用率。在藥物釋放方面，可以根據藥物的性質、給藥途徑和釋藥時間，選用不同聚合程度和不同親疏水性的聚乳酸類材料，采用相應的制備工藝，通過調整聚合物的組成、分子量、載藥量及粒徑的大小等因素，來控制藥物達到不同的釋放特征。

但是由于PLA、PLGA為疏水性材料，因此其對水溶性藥物的包封率較低；同時疏水作用還容易造成對蛋白質結構的破壞，從而使蛋白質失活或者活性降低。因此如何提高親水性蛋白的包封率，保持蛋白質在微球中的活性，提高蛋白的穩定性，成為聚乳酸類微球對親水性蛋白載藥方面成功應用的關鍵問題。

乳化-溶劑揮發法中的復乳法(W/O/W)是應用最廣泛的用于包封水溶性藥物的方法，水溶性蛋白分子的聚乳酸類微粒，通常采用復乳法(W/O/W)進行制備。該方法避免了O/O法中內油相對活性藥物(如基因、蛋白質類藥物)的破壞。但是該法對水溶性蛋白的包封率一般較低，不能達到臨床應用的要求，同時蛋白在制備過程中變性，造成包封藥物活性的下降。大部分研究者通過合成新的材料來提高水溶性蛋白的包封率和活性，但這些新合成的材料應用到臨床還需要很長的周期。部分研究者試圖通過對復乳法(W/O/W)的改進，以提高藥物的包封率。例如期刊J?Micoencapsulation的第21卷第7期(p775-785)以及中國發明專利CN1460468報道的等報道了一種改進的復乳法，該法采用Tween替代PVA作為乳化劑，以含有或不含水溶性鹽或多元醇(或糖、多糖)水溶液為外水相，可提高PLGA微球對牛血清白蛋白的包封率，但該法不能提高蛋白的穩定性；又如中國發明專利CN1575792公開了一種提高蛋白在包封過程中穩定性的方法，其特征為在內水相中添加非離子型表面活性劑聚氧乙烯與聚氧丙稀共聚物，但該法沒有提出提高包封率的途徑。

從復乳法制備的工藝和原理來看，造成蛋白質失活和流失的原因主要包括：1)材料與藥物相容性較差，內水相的蛋白質藥物在形成微球的過程中，向外水相擴散，造成藥物的流失和失活；如果溶劑揮發速度較慢，在微球固化時間延長，將導致藥物向外水相的擴散量的進一步增加，而包封率降低；2)蛋白質藥物在乳化過程中和油相接觸，以及在乳滴的油水界面聚集而發生變性，造成蛋白質的失活。針對上述問題，提高復乳法對水溶性蛋白質包封率的關鍵途徑在于：減小內水相藥物向外水相擴散，抑制蛋白質分子和乳化系統的油水界面發生親疏水相互作用，適當加快溶劑揮發速度。

發明內容

本發明的目的是通過對現有復乳法(W/O/W)制備聚乳酸類微球技術的改進，提高聚乳酸類微球對水溶性蛋白的包封率和蛋白質的穩定性。

本發明以本領域內廣為使用的復乳法(W/O/W)為基礎，通過如下技術方案實現：一種提高聚乳酸類微球對水溶性蛋白包封率的方法，包括以下步驟：