[發明專利]一種γ-氨基丁酸的制備方法

有效

• 申請號: 200910235693.1
• 申請日: 2009-10-21
• 公開（公告）號: CN101705261A
• 公開（公告）日: 2010-05-12
• 發明（設計）人: 李榮杰;薛培儉;尚海濤;鄭輝
• 申請（專利權）人: 安徽豐原發酵技術工程研究有限公司
• 主分類號: C12P13/00
• 分類號: C12P13/00;C12R1/24
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛

1.一種γ-氨基丁酸的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

將經過培養的γ-氨基丁酸生產菌株接種到發酵罐培養基中，進 行有氧、厭氧兩段組合發酵，第一階段為好氧發酵階段，無菌空氣以 通風比為1∶0.8的通風速率流入發酵罐培養基中，攪拌轉速為 300rpm；維持溶氧濃度為65～75％，溫度控制在31℃，好氧培養18 小時，當細胞光密度O.D.值達到28時，轉入第二階段厭氧發酵，厭 氧培養直至發酵結束，厭氧階段溫度控制36℃，添加氨水或氫氧化 鈉將發酵體系pH控制在5.8，發酵40小時，得到γ-氨基丁酸；

在進行發酵培養之前，所述γ-氨基丁酸生產菌株先進行下述培 養步驟：

1)平板培養：采用玉米芯水解液加氮源為平板培養基，將γ- 氨基丁酸生產菌株接到含玉米芯水解液的平板培養基中，30℃培養24 小時；

2)搖瓶種子培養：將平板培養的γ-氨基丁酸生產菌株接到含玉 米芯水解液的搖瓶種子培養基中，33℃培養20小時，pH控制在5.5， 搖床轉速220rpm；

3)種子罐種子培養：將搖瓶種子培養基培養的γ-氨基丁酸生產 菌株接到含玉米芯水解液的種子罐培養基中，33℃培養15小時，pH 控制在5.0，攪拌轉速100rpm，通風比1∶0.7；

所述將經過培養的γ-氨基丁酸生產菌株接種到發酵罐培養基中 為按體積比5％將種子罐培養的γ-氨基丁酸生產菌株接到發酵罐培 養基中；

所述平板培養基包括下述重量百分比的組分：玉米芯水解液 20％，酵母膏0.4％，蛋白胨0.8％，玉米漿0.3％，瓊脂2％，其余為 水；

所述搖瓶種子培養基包括下述重量百分比的組分：玉米芯水解液 20％，酵母膏0.3％，蛋白胨0.7％，玉米漿0.2％，其余為水；

所述種子罐培養基包括下述重量百分比的組分：玉米芯水解液 30％，酵母膏0.3％，蛋白胨0.5％，玉米漿0.2％，其余為水；

所述發酵罐培養基包括下述重量百分比的組分：玉米芯水解液 20％，酵母膏0.3％，蛋白胨0.2％，玉米漿0.5％，MgSO₄·7H₂O?0.002％， MnSO₄?4H₂O?0.005％，KH₂PO₄?0.03％，丁二酸鈉0.6％，L-谷氨酸鈉 6％，其余為水；

所述玉米芯水解液含有8％的葡萄糖和2％的木糖及少量阿拉伯 糖；

所述γ-氨基丁酸生產菌株為乳短桿菌Lactobacillus?brevis? CGMCC?NO.1306。