[發明專利]D-絲氨酸酶法轉化制備方法無效
| 申請號： | 200910233616.2 | 申請日： | 2009-10-26 |
| 公開（公告）號： | CN101717810A | 公開（公告）日： | 2010-06-02 |
| 發明（設計）人： | 焦慶才;趙根海;劉均忠;劉茜 | 申請（專利權）人： | 南京大學 |
| 主分類號： | C12P41/00 | 分類號： | C12P41/00;C12P13/06;C12P13/22 |
| 代理公司： | 南京知識律師事務所 32207 | 代理人： | 胡錫瑜 |
| 地址： | 210097*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 絲氨酸 轉化 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種D-絲氨酸酶法轉化制備方法，其特征是由以下步驟構成：
(1)具有高活力L-色氨酸合成酶的基因工程菌，在含有IPTG(異丙基硫代半乳糖苷)或乳糖的培養基中培養，產生高活力的L-色氨酸合成酶；
(2)用游離細胞法，將含酶細胞或酶提取液與緩沖液配制的含有DL-絲氨酸的轉化液混合，再加入適量的吲哚、表面活性劑和磷酸吡哆醛，在30～50℃條件下進行酶促反應，最適轉化溫度35～45℃。將反應生成物進行分離，得到高純度的D-絲氨酸，同時還得到L-色氨酸。
2.根據權利要求1所述D-絲氨酸酶法轉化制備方法，其特征在于步驟(2)所用的DL-絲氨酸濃度為10g/L～500g/L，最適濃度為50g/L～300g/L，緩沖液包括磷酸緩沖液、碳酸緩沖液或硼酸緩沖液，使轉化液pH7.5～9.5，最適轉化液pH8～9。
3.根據權利要求1所述的D-絲氨酸酶法轉化制備方法，其特征在于步驟(2)所述的表面活性劑包括吐溫-80、十六烷基三甲基溴化銨和聚乙二醇辛基苯基醚，其濃度(g/L)為0.005～5.0。
4.根據權利要求1所述的D-絲氨酸酶法轉化制備方法，其特征在于步驟(2)分離D-絲氨酸和L-色氨酸的方法為等電點結晶法或等電點結晶與離子交換樹脂分離相結合的方法。
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