[發明專利]奶山羊GHRHR基因的單核苷酸多態性及其檢測方法無效
| 申請號: | 200910219003.3 | 申請日: | 2009-11-17 |
| 公開(公告)號: | CN101705289A | 公開(公告)日: | 2010-05-12 |
| 發明(設計)人: | 陳宏;劉艷麗;藍賢勇;屈玉嬌;李轉見;陳忠琦;雷初朝;胡沈榮 | 申請(專利權)人: | 西北農林科技大學 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 西安通大專利代理有限責任公司 61200 | 代理人: | 陸萬壽 |
| 地址: | 712100 陜*** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 山羊 ghrhr 基因 核苷酸 多態性 及其 檢測 方法 | ||
1.一種奶山羊GHRHR基因的單核苷酸多態性的檢測方法,其特征 在于,包括以下步驟:
以包含GHRHR基因的待測奶山羊全基因組DNA為模板,以引物對P 為引物,PCR擴增奶山羊GHRHR基因;用限制性內切酶MspI消化PCR 擴增產物之后,再對酶切后的擴增片段進行瓊脂糖凝膠電泳;根據電泳結 果鑒定SEQ?ID?NO.1所示的奶山羊GHRH基因序列表的第231位堿基多態 性;
根據瓊脂糖凝膠電泳結果鑒定奶山羊GHRHR基因第7307位的單核苷 酸多態性為:CC基因型表現為291bp和134bp條帶;CG基因型表現為 21bp、195bp、134bp和96bp條帶;GG基因型表現為195bp、134bp和 96bp條帶;
所述的引物對P為:
上游引物P1:acgccaccct?ctttcaccc????19;
下游引物P2:catcctgggt?gcttcttgaa?g?21。
2.如權利要求1所述的奶山羊GHRHR基因的單核苷酸多態性的檢測 方法,其特征在于,所述的PCR擴增反應程序為:95℃預變性4~5min; 94℃變性30s,57.0℃復性35s,72℃延伸35s,30~35個循環;72℃ 延伸10min。
3.如權利要求1所述的奶山羊GHRHR基因的單核苷酸多態性的檢測 方法,其特征在于,所述的瓊脂糖凝膠電泳為質量濃度為2%的瓊脂糖凝膠 電泳。
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