[發(fā)明專利]從云南山枇花中提取的活性成分及其應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910218311.4
• 申請日: 2009-12-09
• 公開（公告）號: CN101703629A
• 公開（公告）日: 2010-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張克勤;劉芳芳;李國紅
• 申請（專利權(quán)）人: 云南大學(xué)
• 主分類號: A61K36/82
• 分類號: A61K36/82;A61P31/10;A61K135/00;A61K127/00
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司 53115
• 代理人: 楊宏珍

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種從云南山枇花植物中提取的活性成分及其應(yīng)用，屬生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

淡紫擬青霉[Paecilomyces?lilacinus(Thom.)Samson]屬半知菌綱絲孢菌目、絲孢菌科真菌。它廣泛腐生于土壤、植物根際等，是一類典型的土壤腐生真菌。研究表明，部分?jǐn)M青霉屬(Paecilomyces)的真菌是人體的病原菌，而淡紫擬青霉(P.lilacinus)能引起人的全竇炎。這種由廣泛存在的真菌引起的人的疾病受到關(guān)注。抗生素主要來源于植物和微生物，其中許多已廣泛用于治療各種微生物感染性疾病，由于病原菌不斷產(chǎn)生的耐藥性，原有的醫(yī)用抗菌素在減退，因此迫切需要不斷開發(fā)新的抗生素。

云南山枇花(Gordonia?chrysandra)為山茶科(Theaceae)植物，生長于海拔1100-2400米的闊葉林下或常綠灌叢中，在云南大部分地區(qū)及緬甸有分布。文獻(xiàn)檢索未見有關(guān)云南山枇花具有抗淡紫擬青霉活性的公開報道。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的是從植物產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物中，篩選出對人體病原真菌淡紫擬青霉(P.lilacinus)具有強抑制作用的活性成分，作為制備醫(yī)用抗生素的應(yīng)用。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

1、活性成分的制備

本發(fā)明所用的植物是云南山枇花(G.chrysandra)，采自中國科學(xué)院昆明植物研究所植物園內(nèi)。

本發(fā)明的活性成分經(jīng)如下步驟得到：

a.將云南山枇花的枝或葉用水洗干凈后，在烘箱中50℃溫度下烘干；

b.將烘干后的枝或葉切碎，放入三角瓶內(nèi)，用甲醇浸泡，第一次浸泡提取的時間為4小時，第二次和第三次的時間分別為24和48小時；

c.將三次浸提的提取液合并后，濃縮至溶劑蒸發(fā)后得浸膏；

d.將浸膏用甲醇溶解，制備成濃度為5mg/ml的活性成分。

2、制備試驗用的病原真菌

淡紫擬青霉(P.lilacinus)：將淡紫擬青霉接種于馬鈴薯培養(yǎng)基(馬鈴薯：200克，蔗糖：20克，瓊脂18克，自來水1000ml，pH自然)上，于28℃下培養(yǎng)10天。用無菌蒸餾水將孢子洗下后，加入到PDA培養(yǎng)基中，調(diào)整孢子濃度為10⁴，將含有淡紫擬青霉孢子的PDA培養(yǎng)基倒入9cm的平板中，待培養(yǎng)基凝固后，凍于4℃冰箱中備用。

3、試驗方法

紙片擴(kuò)散法：在無菌操作臺上用微量注射器將樣品注入紙片(做兩個劑量，0.5mg/disc，0.1mg/disc)，用電吹風(fēng)將紙片吹干待溶劑揮發(fā)后，置于含有淡紫擬青霉孢子的PDA平板上，28℃下培養(yǎng)48小時后，觀察抑菌結(jié)果，測量抑菌圈的大小(含紙片的直徑0.6cm)。同時在紙片上加入提取過程中使用過的溶劑甲醇作為對照，同時還做空白紙片對照。整個實驗重復(fù)3次。

本發(fā)明的從云南山枇花植物中提取的活性成分，對人體病原真菌淡紫擬青霉(P.lilacinus)有強抑制作用，可作為制備醫(yī)用抗生素應(yīng)用。

本發(fā)明的從云南山枇花植物的枝和葉中提取的活性成分，具有成本低，制備方法簡便，對人體病原真菌淡紫擬青霉(P.lilacinus)有強抑制作用的優(yōu)點，能用于醫(yī)用抗生素的制備。

具體實施方式：

實施例一：

云南山枇花的葉用水洗干凈后，在烘箱中50℃烘干。將烘干后的葉切碎，放入三角瓶內(nèi)，用甲醇浸泡，第一次浸泡提取的時間為4小時，第二次和第三次的時間分別為24和48小時。將三次浸提的提取液合并后濃縮至溶劑蒸發(fā)得浸膏。該浸膏用甲醇溶解，制備成濃度為5mg/ml，用于做活性測定。同時做對照，結(jié)果見表1。

表1云南山枇花的葉提取物對淡紫擬青霉(P.lilacinus)的抑菌作用