[發(fā)明專(zhuān)利]一種從豆科植物興安胡枝子中提取蘇苦西堿的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910216882.4
• 申請(qǐng)日: 2009-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101775419A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-07-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚德坤;姚德利;閆峰;姚航
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 大興安嶺林格貝有機(jī)食品有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P17/18
• 分類(lèi)號(hào): C12P17/18;C07D471/22
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種從豆科植物興安胡枝子中提取蘇苦西堿的方法。

背景技術(shù)

胡枝子(Lespdeza?bicolor?Turcz)，又名杏條、三色胡枝子、隨軍茶等，屬豆科胡枝子屬Lespdeza?Michx植物約60余種，分布于東南亞至澳大利亞?wèn)|北不及北美。我國(guó)產(chǎn)26種，除新疆外，廣泛于全國(guó)各省區(qū)。對(duì)于胡枝子屬植物的藥用價(jià)值，人們?cè)缬姓J(rèn)識(shí)，在民萜、有機(jī)酸及甾醇類(lèi)成分等。胡枝子總黃酮部分對(duì)降低血中殘余氮含量，敢刪腎功能有肯定療效，可用于治療慢性腎小球、尿毒癥、腎盂腎炎、腎結(jié)核及腎萎縮等癥狀。從本屬植物中已分離鑒定的化學(xué)成分包括黃酮、生物堿、三萜、有機(jī)酸及甾醇類(lèi)等?；瘜W(xué)成分，地上部分分離得到葒草素(orientin)、異葒草素、異葒草素-2”-木糖甙、異牡荊素(isovitex-in)異牡荊素-2”-木糖甙異鼠李素-3-O-蕓香糖甙，isoshaftoside/香葉木素-7-o木糖甙(diosrmetin-7-o-xyloside)等成分

尼葛林堿、拉斯皮堿和蘇苦西堿生物堿是從胡枝子屬植物中最早分離到的一類(lèi)活性成分，但到目前為止從該屬植物中分離鑒定了7個(gè)生物堿類(lèi)化合物。1968年，日本學(xué)者GotOr等人從多花胡枝子L.florbundaBunge中分離得到尼葛林(Nb，Nb-dimethyltryptamine)，并通過(guò)化學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行了鑒定。1965年，Morimoto等人從該植物中分得一個(gè)新生物堿，利用UV.IR、NMR何化學(xué)方法鑒定了其結(jié)構(gòu)，命名為拉斯皮生物堿lespedamine和蘇苦西堿.現(xiàn)代藥理研究和臨床表明，胡枝子生物堿具有多種生物活性和療效，尼葛林堿是治療心腦血管和老年癡呆癥的特效藥，對(duì)癡呆患者和腦器質(zhì)性病變引起的記憶障礙亦有改善作用；蘇苦西堿還具有抗癌鎮(zhèn)痛作用；其衍生物生物堿拉斯皮生物堿銨鹽用于治療消化道癌、肝癌、卵巢癌、肺癌、頭頸部癌、惡性淋巴癌等，其中對(duì)胃癌、卵巢癌療效較好。

目前，現(xiàn)有技術(shù)中以胡枝子為原料，經(jīng)過(guò)繁瑣的提取分離純化步驟，只產(chǎn)生一種胡枝子尼葛林堿產(chǎn)品，而富含蘇苦西堿和拉斯皮堿活性成分的生物堿沒(méi)有充分利，并且生產(chǎn)周期長(zhǎng)、產(chǎn)率收率高、產(chǎn)品遠(yuǎn)還沒(méi)有達(dá)到藥用級(jí)的高純度要求?？傊?，現(xiàn)有以胡枝子為原料生產(chǎn)生物堿的方法存在以下不足：產(chǎn)品單一、步驟繁鎖、周期長(zhǎng)、產(chǎn)品收得率不高、安全系數(shù)低、成本高、胡枝子資源利用率不高和環(huán)境污染嚴(yán)重，以及不易產(chǎn)業(yè)化。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種從豆科胡枝子屬植物中綜合提取生物堿的方法，該方法產(chǎn)品收得率高，成本低，便于工業(yè)化生產(chǎn)，可以同時(shí)得到3種產(chǎn)品，并且環(huán)境污染小。

本發(fā)明提供的從豆科胡枝子屬植物中提取生物堿的方法，其步驟包括：

(1)在切碎后的興安胡枝子中加入體積為6倍量的工藝水，再加入復(fù)合纖維素酶，復(fù)合纖維素酶與豆科植物興安胡枝子的質(zhì)量百分比為0.1~0.5％，調(diào)節(jié)pH值至5~8，在溫度20~60℃下酶解12-36小時(shí)，再將酶解后胡枝子屬植物細(xì)胞破碎，過(guò)濾，得到提取液；

(2)濃縮上述提取液，得到提取物濃縮液，濃縮終點(diǎn)為該濃縮液的比重在20℃測(cè)量時(shí)為1.05～1.10之間；

(3)按pH值分步對(duì)上述提取物濃縮液進(jìn)行超聲波萃??；

(4)將萃取各步得到的產(chǎn)物以粗產(chǎn)品比填料為1∶70～1∶20的量分別進(jìn)行柱層析，再用進(jìn)行梯度洗脫；

(5)將柱層析分離得到的相同組分合并，反復(fù)重結(jié)晶，尼葛林堿、拉斯皮堿和蘇苦西堿高純度單體。

本發(fā)明方法對(duì)上述技術(shù)方案進(jìn)行了下述優(yōu)化，

步驟(1)中復(fù)合纖維素酶的組分及質(zhì)量比為：纖維素酶40-50％，果膠酶30-40％、半纖維素酶20-30％。

步驟(2)按下述過(guò)程進(jìn)行萃取：

第一步萃?。簩⒚附夂筇崛∥餄饪s液的pH值調(diào)到3-5，加入10～15倍體積有機(jī)溶劑，用頻率40KHz超聲提取50-65min，萃取1～3次。進(jìn)行萃取3次萃取液合并有機(jī)溶劑相，減壓回收有機(jī)溶劑，得膏狀物，比重在1.05-1.1之間，為第一步萃取產(chǎn)物。

第二步萃?。簩⒌谝徊捷腿‘a(chǎn)物加入pH值調(diào)到6.5-7.2，加入10～15倍體積有機(jī)溶劑，用頻率40KHz超聲提取50-55min，進(jìn)行萃取1-3次，合并有機(jī)溶劑相，減壓回收有機(jī)溶劑，得膏狀物，比重在1.05-1.1之間，為第二步萃取產(chǎn)物。