[發明專利]一種治療銀屑病的小干擾RNA

有效

• 申請號: 200910216272.4
• 申請日: 2009-11-20
• 公開（公告）號: CN102071190A
• 公開（公告）日: 2011-05-25
• 發明（設計）人: 郭驍才
• 申請（專利權）人: 中國科學院成都生物研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;A61K48/00;A61P17/06
• 代理公司: 成都賽恩斯知識產權代理事務所(普通合伙) 51212
• 代理人: 肖國華

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種治療銀屑病的短的、雙鏈的核糖核酸即小干擾RNA(siRNA)。?

背景技術

銀屑病，俗稱牛皮癬，是一種慢性自體免疫性皮膚病，其特征為嚴重的鱗狀紅斑，目前仍無法徹底治愈，導致牛皮癬的確切原因至今尚未搞清。此外，現有的治療手段也存在著一定的局限，例如不方便、療效有限、毒性以及開銷巨大。?

據美國Kalorama?Information的2006年的研究“銀屑病及銀屑病性關節炎：市場的戰略分析”，美國銀屑病和銀屑病性關節炎患病人數約為780萬人；預計2016年美國銀屑病和銀屑病性關節炎患病人數將達到850萬人。?

在正常人群中，西方人發病率為1.2～3.0％，中國人口發病率約為0.8％(由于我國人對銀屑病的心理障礙，國內數據可能低于實際值)；從種群來看，發病率由高到低的人種依次為：白種人，黃種人和黑人。據近年數據，我國每年新增銀屑病病例10萬人以上。全球有超過1億銀屑病患者(有數據認為全球有1.2～1.8億銀屑病患者)。?

國內外學者通過普查發現銀屑病家族的發病率較一般家庭高。雖然調查結果各家不一，最低為4.4％，最高為90.9％，但多數調查結果為10.0％～39.0％。1957年Hoede在Wuzburg地區連續多年觀察發現，銀屑病患者中80％有家族遺傳史。1984年我國的銀屑病流行病學調查報告也有數據表明，銀屑病家族中一級親屬銀屑病患病率是當地自然人口患病率的11.4倍。?

這些數據表明，銀屑病發病具有明顯的家族性。?

銀屑病的發病機理迄今為止仍不清楚，所涉及基因更不清楚，在治療上也沒有根治的藥物或治療技術流程。?

目前，國內治療銀屑病的主要藥物是化學藥，國際上以美國為主開始有生物制劑進入銀屑病的治療市場。表1、表2列舉了一些銀屑病治療的藥物或技術。?

表1目前我國治療銀屑病的主要藥物和技術?

表2治療銀屑病的生物藥?

RNA干擾現象于1998年發現，僅僅過去8年，2006年度的諾貝爾醫學生理學獎就授予了RNA干擾的發現者。這么短的時間就授予諾貝爾獎，在醫學生理學領域是少見的，一般來說需要經過十多年甚至數十年的考驗。因此，業內科學家的評價是，獲獎充分說明了RNA干擾和小RNA的重要性。?

從RNA干擾現象發現后不久，小RNA可能成為潛在的未來藥物就已經進入國際制藥巨頭的視野。2003年6月中旬在美國的San?Diego的一個小RNA國際會議上，參加會議的人員以國際制藥企業為主。這是國際制藥巨頭將小RNA藥物鎖定為未來藥物一個標志。?

小干擾RNA(siRNA)，可以特異地切斷靶mRNA，使得靶基因的直接產物mRNA解體，阻斷蛋白質的產生，準確地阻斷靶基因的表達，從而疾病不能發生或繼續。?

與前面所述的化學藥物、生物制劑等靶向蛋白質的藥物不同，小干擾RNA是靶向mRNA的藥物，即藥物分子直接作用于mRNA，阻斷蛋白質的產生，從而阻斷了發病進程。而靶向蛋白質的藥物，是在蛋白質產生之后作用于蛋白質的，這時蛋白質已經發生生物學效應，即病變已經發生或開始發生。?

發明內容

本發明的目的是提供一種治療銀屑病的小干擾RNA(siRNA)。?

本發明提供一種治療銀屑病的小干擾RNA(siRNA)，其特征在于所述的siRNA序列如下：?

靶序列：5’-3’aatttctgccagctccagaag?

正義鏈：5’-3’uuucugccagcuccagaagTT?

反義鏈：3’-5’TTaaagacggucgaggucuuc?

本發明所述的siRNA，可用于制備治療銀屑病的藥物。?

DEPC水的制備：玻璃蒸餾器蒸餾得三重蒸餾水(d3H2O)，每100毫升三重蒸餾水加入0.2毫升DEPC，室溫下保溫3～5小時，然后在121℃以上溫度高壓濕熱滅菌15～25分鐘，得到DEPC水。?

小干擾RNA液體的制備：取DEPC水，將小干擾RNA稀釋到最終濃度5～10nM，得小干擾RNA液體。零下20℃或更低溫度保存備用。?

擦涂方法及治療處理流程：每日1～3次，每次按每400～600平方厘米擦涂0.5ml小干擾RNA液體。先用熱水浸泡或濕的熱毛巾濕敷銀屑病皮損處，泡軟皮膚后，清除皮屑和角質化死皮。取冰凍保存的小干擾RNA液體，室溫(15～25℃)下自然融化為液體，然后將小?干擾RNA液體涂抹到患處。?