[發(fā)明專利]一種治療銀屑病的小干擾RNA

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910216271.X
• 申請日: 2009-11-20
• 公開（公告）號: CN102071189A
• 公開（公告）日: 2011-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭驍才
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院成都生物研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;A61K48/00;A61P17/06
• 代理公司: 成都賽恩斯知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51212
• 代理人: 肖國華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種治療銀屑病的短的、雙鏈的核糖核酸即小干擾RNA(siRNA)。?

背景技術(shù)

銀屑病，俗稱牛皮癬，是一種慢性自體免疫性皮膚病，其特征為嚴(yán)重的鱗狀紅斑，目前仍無法徹底治愈，導(dǎo)致牛皮癬的確切原因至今尚未搞清。此外，現(xiàn)有的治療手段也存在著一定的局限，例如不方便、療效有限、毒性以及開銷巨大。?

據(jù)美國Kalorama?Information的2006年的研究“銀屑病及銀屑病性關(guān)節(jié)炎：市場的戰(zhàn)略分析”，美國銀屑病和銀屑病性關(guān)節(jié)炎患病人數(shù)約為780萬人；預(yù)計2016年美國銀屑病和銀屑病性關(guān)節(jié)炎患病人數(shù)將達(dá)到850萬人。?

在正常人群中，西方人發(fā)病率為1.2～3.0％，中國人口發(fā)病率約為0.8％(由于我國人對銀屑病的心理障礙，國內(nèi)數(shù)據(jù)可能低于實(shí)際值)；從種群來看，發(fā)病率由高到低的人種依次為：白種人，黃種人和黑人。據(jù)近年數(shù)據(jù)，我國每年新增銀屑病病例10萬人以上。全球有超過1億銀屑病患者(有數(shù)據(jù)認(rèn)為全球有1.2～1.8億銀屑病患者)。?

國內(nèi)外學(xué)者通過普查發(fā)現(xiàn)銀屑病家族的發(fā)病率較一般家庭高。雖然調(diào)查結(jié)果各家不一，最低為4.4％，最高為90.9％，但多數(shù)調(diào)查結(jié)果為10.0％～39.0％。1957年Hoede在Wuzburg地區(qū)連續(xù)多年觀察發(fā)現(xiàn)，銀屑病患者中80％有家族遺傳史。1984年我國的銀屑病流行病學(xué)調(diào)查報告也有數(shù)據(jù)表明，銀屑病家族中一級親屬銀屑病患病率是當(dāng)?shù)刈匀蝗丝诨疾÷实?1.4倍。這些數(shù)據(jù)表明，銀屑病發(fā)病具有明顯的家族性。?

銀屑病的發(fā)病機(jī)理迄今為止仍不清楚，所涉及基因更不清楚，在治療上也沒有根治的藥物或治療技術(shù)流程。?

目前，國內(nèi)治療銀屑病的主要藥物是化學(xué)藥，國際上以美國為主開始有生物制劑進(jìn)入銀屑病的治療市場。表1、表2列舉了一些銀屑病治療的藥物或技術(shù)。?

表1目前我國治療銀屑病的主要藥物和技術(shù)?

表2治療銀屑病的生物藥?

RNA干擾現(xiàn)象于1998年發(fā)現(xiàn)，僅僅過去8年，2006年度的諾貝爾醫(yī)學(xué)生理學(xué)獎就授予了RNA干擾的發(fā)現(xiàn)者。這么短的時間就授予諾貝爾獎，在醫(yī)學(xué)生理學(xué)領(lǐng)域是少見的，一般來說需要經(jīng)過十多年甚至數(shù)十年的考驗(yàn)。因此，業(yè)內(nèi)科學(xué)家的評價是，獲獎充分說明了RNA干擾和小RNA的重要性。?

從RNA干擾現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)后不久，小RNA可能成為潛在的未來藥物就已經(jīng)進(jìn)入國際制藥巨頭的視野。2003年6月中旬在美國的San?Diego的一個小RNA國際會議上，參加會議的人員以國際制藥企業(yè)為主。這是國際制藥巨頭將小RNA藥物鎖定為未來藥物一個標(biāo)志。?

小干擾RNA(siRNA)，可以特異地切斷靶mRNA，使得靶基因的直接產(chǎn)物mRNA解體，阻斷蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，準(zhǔn)確地阻斷靶基因的表達(dá)，從而疾病不能發(fā)生或繼續(xù)。?

與前面所述的化學(xué)藥物、生物制劑等靶向蛋白質(zhì)的藥物不同，小干擾RNA是靶向mRNA的藥物，即藥物分子直接作用于mRNA，阻斷蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，從而阻斷了發(fā)病進(jìn)程。而靶向蛋白質(zhì)的藥物，是在蛋白質(zhì)產(chǎn)生之后作用于蛋白質(zhì)的，這時蛋白質(zhì)已經(jīng)發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)，即病變已經(jīng)發(fā)生或開始發(fā)生。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種治療銀屑病的小干擾RNA(siRNA)。?

本發(fā)明提供一種治療銀屑病的小干擾RNA(siRNA)，其特征在于所述的siRNA序列如下：?

靶序列：5’-3’aattaaaaagctgaagaggaa?

正義鏈：5’-3’uuaaaaagcugaagaggaaTT?

反義鏈：3’-5’TTaauuuuucgacuucuccuu?

本發(fā)明所述的siRNA，可用于制備治療銀屑病的藥物。?

DEPC水的制備：玻璃蒸餾器蒸餾得三重蒸餾水(d3H2O)，每100毫升三重蒸餾水加入0.2毫升DEPC，室溫下保溫3～5小時，然后在121℃以上溫度高壓濕熱滅菌15～25分鐘，得到DEPC水。?

小干擾RNA液體的制備：取DEPC水，將小干擾RNA稀釋到最終濃度5～10nM，得小干擾RNA液體。零下20℃或更低溫度保存?zhèn)溆谩?

擦涂方法及治療處理流程：每日1～3次，每次按每400～600平方厘米擦涂0.5ml小干擾RNA液體。先用熱水浸泡或濕的熱毛巾濕敷銀屑病皮損處，泡軟皮膚后，清除皮屑和角質(zhì)化死皮。取冰凍保存的小干擾RNA液體，室溫(15～25℃)下自然融化為液體，然后將小?干擾RNA液體涂抹到患處。?