[發明專利]篩選耐熱性奶牛的HSP70AlA基因SNP位點、應用及試劑盒無效
| 申請號: | 200910210772.7 | 申請日: | 2009-11-09 |
| 公開(公告)號: | CN101693923A | 公開(公告)日: | 2010-04-14 |
| 發明(設計)人: | 李秋玲;王長法;李建斌;仲躋峰 | 申請(專利權)人: | 山東奧克斯生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京北新智誠知識產權代理有限公司 11100 | 代理人: | 程鳳儒 |
| 地址: | 250100 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 篩選 耐熱性 奶牛 hsp70ala 基因 snp 應用 試劑盒 | ||
1.一種篩選耐熱性奶牛的方法,其特征在于,所述方法為:提取奶 牛基因組DNA,測定奶牛HSP70A1A基因第6400位、6600位和6601位堿基 多態性,根據奶牛第6400位、6600位和6601位的單倍型組合預測奶牛的 耐熱性;所述引物如序列表SEQ?ID?NO.2和SEQ?ID?NO.3所示的堿基序列。
2.根據權利要求1所述的篩選耐熱性奶牛的方法,其特征在于, 所述奶牛HSP70A1A基因第6400位、6600位和6601位基因單倍型組合為 GCG/CTA基因型時,奶牛耐熱性最強。
3.根據權利要求1或2所述的篩選耐熱性奶牛的方法,其特征在 于,所述奶牛HSP70A1A基因第6400位、6600位和6601位基因單倍型組合 為GCG/CTG基因型時,奶牛耐熱性最差。
4.一種篩選耐熱性奶牛的引物,其特征在于,所述引物如序列表SEQ ID?NO.2和SEQ?ID?NO.3所示的堿基序列。
5.根據權利要求4所述的篩選耐熱性奶牛的引物,其特征在于,所 述引物可以特異性擴增出含HSP70A1A基因的SEQ?ID?NO.1所示序列。
6.一種篩選耐熱性奶牛的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒為 100頭牛檢測劑量,試劑盒的保存溫度為-20℃,試劑盒包括:
120μL10×PCR緩沖液;
24μL?10mM?dNTP;
10μL?5unit/μL?Taq?DNA聚合酶;
10mM的上下游引物各24μL;
25mmol/L?MgCl2?75μL;
1ml純水。
所述引物如序列表SEQ?ID?NO.2和SEQ?ID?NO.3所示的堿基序列。
7.根據權利要求6所述的篩選耐熱性奶牛的試劑盒,其特征在 于,所述試劑盒還包括與HSP70A1A基因第6400位、6600位和6601位突變 結合的探針和識別HSP70A1A基因中第6400位、6600位和6601位突變的限 制性內切酶。
8.HSP70A1A基因第6400位、第6600位和第6601位SNP堿基位點用于 制備篩選耐熱性奶牛試劑盒的應用。
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