[發明專利]洛伐他汀的制備方法

無效

• 申請號: 200910210446.6
• 申請日: 2009-11-03
• 公開（公告）號: CN101691590A
• 公開（公告）日: 2010-04-07
• 發明（設計）人: 葛祥斌;楊俊發;李克強;劉志強
• 申請（專利權）人: 煙臺只楚藥業有限公司
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

(一)、技術領域????本發明涉及洛伐他汀的一種制備方法。

(二)、背景技術????洛伐他汀在體內竟爭性地仰制膽固醇合成過程中的限速酶羥甲或二酰輔酶A還原酶，使膽固醇合成減少，對動脈粥樣硬化和冠心病具有防治作用。洛伐他汀由微生物發酵經提取精制獲得，發酵單位的高低直接影響產量的高低。

傳統發酵培養基配方由于其營養結構，酸堿環境不合理，普遍存在發酵單位低(一般在8000單位左右)，發酵周期長(一般為8天左右)的缺點。

(三)、發明內容????本發明所要解決的技術問題是，提供一種新的洛伐他汀的制備方法，通過改善發酵培養基的配方結構，提高發酵單位，縮短發酵周期。

為了解決上述技術問題，本發明采用了以下技術方案。

一種洛伐他汀的制備方法，其特征在于主要包括以下步驟：在培養基中加入培養基重量0.4％～0.8％的檸檬酸，培養基重量0.4％～0.64％的醋酸鈉，培養基重量0.016％～0.032％的氫氧化鈉，培養基重量0.08％～0.24％的碳酸鈣，制成新培養基；新培養基滅菌；將洛伐他汀菌種接入新培養基中；培養。

本發明的積極效果是：本發明通過在洛伐他汀發酵配方中加入特定種類和比例的添加劑，改善了發酵培養基的配方結構，優化了發酵酸堿環境，與原有方法相比較，洛伐他汀發酵單位提高30％左右，發酵周期由過去的8天縮短為5天。

(四)、具體實施方式????下面結合實施例對本發明作進一步描述。

實施例一

原料配方如下：

(一)、培養基：水1000克，葡萄糖200克，大豆粉40克，蛋白胨10克，麥芽提取物0.5克，KH₂PO₄0.5克，MgSO₄0.5克，NaCl2克。

(二)、添加劑：檸檬酸7.5克，醋酸鈉6.5克，氫氧化鈉0.3克，碳酸鈣2克。

制備方法如下：

將全部原料在發酵罐內混勻，制成新培養基，攪拌下120℃、30分鐘滅菌；將洛伐他汀菌種接入經滅菌的新培養基中；26℃下，通入無菌空氣，培養5天。其他工藝步驟和條件均按常規。經檢測，發酵單位9000單位。

實施例二

原料配方如下：

(一)、培養基：水1000克，葡萄糖200克，大豆粉40克，蛋白胨10克，麥芽提取物0.5克，KH₂PO₄0.5克，MgSO₄0.5克，NaCl2克。

(二)、添加劑：檸檬酸5克，醋酸鈉8克，氫氧化鈉0.2克，碳酸鈣3克。

制備方法如下：

將全部原料在發酵罐內混勻，制成新培養基，攪拌下120℃、30分鐘滅菌；將洛伐他汀菌種接入經滅菌的新培養基中；26℃下，通入無菌空氣，培養5天。其他工藝步驟和條件均按常規。經檢測，發酵單位9500單位。

實施例三

原料配方如下：

(一)、培養基：水1000克，葡萄糖200克，大豆粉40克，蛋白胨10克，麥芽提取物0.5克，KH₂PO₄0.5克，MgSO₄0.5克，NaCl2克。

(二)、添加劑：檸檬酸10克，醋酸鈉5克，氫氧化鈉0.4克，碳酸鈣1克。

制備方法如下：

將全部原料在發酵罐內混勻，制成新培養基，攪拌下120℃、30分鐘滅菌；將洛伐他汀菌種接入經滅菌的新培養基中；26℃下，通入無菌空氣，培養5天。其他工藝步驟和條件均按常規。經檢測，發酵單位11000單位。

發酵液中洛伐他汀含量的分析檢測方法中，樣品制備方法是：1)、從培養瓶或發酵罐中(10±1天)取發酵液20ml，用6N的HCl調節pH值至4～5(20ml發酵液大約需要2～3滴的6N的HCl)；2)、加2倍量的乙酸；3)、用鋁箔或塑料膜密封燒瓶；4)、燒瓶震蕩1小時以便將產物提取入有機溶媒中；5)、HPLC分析：制備有機提取液與甲醇溶液(1∶20)，混合后12000rpm離心3分鐘，取上清液作HPLC分析。