[發明專利]一種檢測乳蛋白含量的光激化學發光免疫定量試劑盒及方法

無效

• 申請號: 200910205826.0
• 申請日: 2009-10-09
• 公開（公告）號: CN101813699A
• 公開（公告）日: 2010-08-25
• 發明（設計）人: 毛曉伏
• 申請（專利權）人: 毛曉伏
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N21/63;G01N21/76
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1.一種檢測乳蛋白的光激化學發光免疫定量試劑盒，其特征在于其包括：乳蛋白抗體包被的發光微粒、生物素標記的乳蛋白抗體、親和素包被的感光微粒以及緩沖液溶劑。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述的緩沖液溶劑為PH8.025mM?HEPES緩沖液。

3.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于所述的PH8.025mM?HEPES緩沖液每1000ml含有HEPES?6g，BSA?1g，Glycer?100g，Dextran-500?1g，Triton?X-100?5g，EDTA-Na-2H2O?0.372g，Proclin-300?0.5g。

4.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述的乳蛋白抗體包被的發光微粒由下述方法制得：

1)混合：將發光微粒與乳蛋白抗體混合于MES緩沖液中，其中發光微粒的濃度為10～40mg/ml；

2)反應：加入MES緩沖液配制的NaBH₃CN溶液混合并反應；

3)封閉：加入MES緩沖液配制的Glycin及NaBH₃CN溶液，混勻反應后，再加入BSA溶液封閉；

4)清洗產物，獲得乳蛋白抗體包被的發光微粒。

5.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于步驟1)中每1mg發光微粒加入0.05～2mg的乳蛋白抗體。

6.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于所述的MES緩沖液的濃度為0.05M、pH為6.0。

7.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述的乳蛋白選自酪蛋白、乳清蛋白和乳鐵蛋白。

8.一種采用如權利要求1～7任一項所述的試劑盒檢測乳蛋白的光激化學發光免疫定量方法，其特征在于包括下列步驟：

1)在反應孔中加入稀釋后的待測樣品、加有緩沖液溶劑的乳蛋白抗體包被的發光微粒混懸液及生物素標記的乳蛋白抗體混懸液，獲得初始反應溶液，充分混合；

2)加入加有緩沖液溶劑的親和素包被的感光微粒混懸液獲得最終反應溶液進行反應；

3)激發光照射反應孔，測量每個反應孔發光光子量獲得光信號值。

9.如權利要求8所述的方法，其特征在于步驟1)中的乳蛋白抗體包被的發光微粒混懸液的濃度為50μg/ml，生物素標記的乳蛋白抗體混懸液的濃度為4μg/ml；步驟2)中的親和素包被的感光微粒混懸液的濃度為80μg/ml。

10.如權利要求8所述的方法，其特征在于步驟3)所述的激發光光源波長范圍為600～800nm；發射光檢測波長范圍為500～680nm。