[發明專利]雙液相萃取的生物法制備天然手性γ-癸內酯的方法

有效

• 申請號: 200910199593.8
• 申請日: 2009-11-27
• 公開（公告）號: CN102080109A
• 公開（公告）日: 2011-06-01
• 發明（設計）人: 李元芳;張兆斌;陳洪;杜毅;許平;魏中浩
• 申請（專利權）人: 愛普香料集團股份有限公司
• 主分類號: C12P17/04
• 分類號: C12P17/04;C07D307/33;C12R1/645
• 代理公司: 上海市華誠律師事務所 31210
• 代理人: 李平

1.一種制備天然手性γ-癸內酯的方法，其特征在于使用解脂耶氏酵母Yarrowialipolytica?As2.1405經過擴大培養的種子液，接種于轉化培養基，以蓖麻油為底物進行生物轉化制備天然γ-癸內酯，在轉化過程中采用添加有機溶劑的雙液相萃取原位產物分離技術，使生物轉化合成與產物分離提取過程相耦合，以提高了γ-癸內酯產量。

2.如權利要求1所述制備天然手性γ-癸內酯的方法，其特征在于所述種子液按如下步驟制備得到：將菌種接種于斜面培養基，經活化培養得到新鮮菌種，該菌種再接種于液體種子培養基，經過培養得到成熟的酵母種子液，所述斜面培養基配方為：葡萄糖10克/升，鈉鹽5克/升，蛋白胨10克/升，牛肉膏5克/升，瓊脂20克/升，pH?7.0。液體種子培養基的配方為：葡萄糖30克/升，酵母粉10克/升，鉀鹽1.2克/升，鈉鹽0.35克/升，pH?6.5。

3.如權利要求1所述制備天然手性γ-癸內酯的方法，其特征在于該生物轉化過程以蓖麻油為底物，在有機溶劑存在的條件下進行搖床振蕩培養，轉速為100～200轉/分鐘，溫度為20～40℃，轉化時間為18～72小時，獲得高濃度γ-癸內酯的轉化液。

4.如權利要求1所述制備天然手性γ-癸內酯的方法，其特征在于所用的轉化培養基配方為：蓖麻油10～60克/升，蛋白胨5～20克/升，酵母粉5～20克/升，鉀鹽1～10克/升，鈉鹽5～20克/升，乳化劑吐溫-800～10克/升，pH?5～9。

5.如權利要求1所述制備天然手性γ-癸內酯的方法，其特征在于轉化過程中添加的有機溶劑為十四酸異丙酯或十六酸異丙酯。

6.如權利要求1所述制備天然手性γ-癸內酯的方法，其特征在于所述有機溶劑的添加時間為細胞培養開始后0～30小時。

7.如權利要求1或5或6所述制備天然手性γ-癸內酯的方法，其特征在于所述有機溶劑的體積用量與轉化培養基體積比為1∶1～5。

8.用權利要求1所述的方法得到天然γ-癸內酯產品，該產品具有如下特征：純度(GC)≥98.3％，旋光度+38.12～+45.5度，對映體過量率(e.e.％)：93.42％。