[發明專利]利用初級糖代謝基因提高阿維菌素的產量

無效

• 申請號: 200910199530.2
• 申請日: 2009-11-27
• 公開（公告）號: CN101717778A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發明（設計）人: 唐功利;王健博
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海有機化學研究所
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N15/09;C12N15/76;C12P19/62;C12R1/465
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司 31213
• 代理人: 鄔震中

1.一種生產阿維菌素的方法，其特征是采用經6-磷酸葡萄糖脫氫酶基因zwf2置換失活后的除蟲鏈霉菌用于生產阿維菌素。

2.如權利要求1所述的生產阿維菌素的方法，其特征在于所述的zwf2基因置換失活包括如下步驟：

(1)，以Streptomyces?avermitilii的基因組為模板，采用PCR方法獲得zwf2基因置換所須的左臂序列，包括上游序列及部分相應基因序列約2kb；

(2)，以Streptomyces?avermitilii的基因組為模板，采用PCR方法獲得zwf2基因置換所須的右臂序列，包括下游序列及部分相應基因序列約2kb；

(3)，將(1)和(2)步驟得到的左右臂序列和包含或不包含抗性基因片段，通過相應的酶切位點克隆入pKC1139載體中構建成基因置換重組質粒；

(4)，將(3)步驟獲得的重組質粒以接合轉移的方法轉入Streptomyces?avermitilii中，經整合、松弛培養誘導發生雙交換及篩選鑒定后完成目標基因失活。

3.如權利要求1所述的方法，其特征是所述的zwf2基因具有如下核苷酸序列：

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