[發(fā)明專利]一種雙功能谷胱甘肽合成酶及利用其生產(chǎn)谷胱甘肽的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910199345.3 | 申請日: | 2009-11-25 |
| 公開(公告)號: | CN102071171A | 公開(公告)日: | 2011-05-25 |
| 發(fā)明(設計)人: | 葉勤;李志敏;李娓 | 申請(專利權(quán))人: | 華東理工大學 |
| 主分類號: | C12N9/00 | 分類號: | C12N9/00;C12N15/52;C12P21/02;C12R1/01;C12R1/085;C12R1/46;C12R1/19;C12R1/125;C12R1/38;C12R1/865;C12R1/84;C12R1/78;C12R1/685;C1 |
| 代理公司: | 上海翼勝專利商標事務所(普通合伙) 31218 | 代理人: | 翟羽 |
| 地址: | 200237 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 功能 谷胱甘肽 合成 利用 生產(chǎn) 方法 | ||
1.一種雙功能谷胱甘肽合成酶,同時具有γ-谷氨酰基半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶兩種功能,其特征在于:所述雙功能谷胱甘肽合成酶由如下微生物產(chǎn)生:
豬胸膜肺炎放線桿菌、琥珀酸放線桿菌、蠟狀芽孢桿菌、血鏈球菌、格氏鏈球菌、乳房鏈球菌和嗜熱鏈球菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙功能谷胱甘肽合成酶,其特征在于:所述雙功能谷胱甘肽合成酶的氨基酸序列分別如SEQ?ID?NO:1——SEQ?ID?NO:7所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙功能谷胱甘肽合成酶,其特征在于:所述雙功能谷胱甘肽合成酶由gshF編碼,其基因序列分別如SEQ?ID?NO:8——SEQ?IDNO:14所示。
4.一種利用權(quán)利要求1所述的雙功能谷胱甘肽合成酶合成谷胱甘肽的方法,其特征在于:由豬胸膜肺炎放線桿菌、琥珀酸放線桿菌、蠟狀芽孢桿菌、血鏈球菌、格氏鏈球菌、乳房鏈球菌和嗜熱鏈球菌為催化劑合成谷胱甘肽;或由利用這些微生物提取的雙功能谷胱甘肽合成酶為催化劑合成谷胱甘肽。
5.一種利用權(quán)利要求1所述的雙功能谷胱甘肽合成酶合成谷胱甘肽的方法,其特征在于:由表達豬胸膜肺炎放線桿菌、琥珀酸放線桿菌、蠟狀芽孢桿菌、血鏈球菌、格氏鏈球菌、乳房鏈球菌和嗜熱鏈球菌gshF的基因工程菌為催化劑合成谷胱甘肽;或由表達豬胸膜肺炎放線桿菌、琥珀酸放線桿菌、蠟狀芽孢桿菌、血鏈球菌、格氏鏈球菌、乳房鏈球菌和嗜熱鏈球菌gshF的基因工程菌提取的雙功能谷胱甘肽合成酶為催化劑合成谷胱甘肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的合成谷胱甘肽的方法,其特征在于:利用豬胸膜肺炎放線桿菌、琥珀酸放線桿菌、蠟狀芽孢桿菌、血鏈球菌、格氏鏈球菌、乳房鏈球菌和嗜熱鏈球菌gshF自身啟動子調(diào)控gshF基因轉(zhuǎn)錄。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的合成谷胱甘肽的方法,其特征在于:利用高效啟動子調(diào)控gshF基因轉(zhuǎn)錄。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的合成谷胱甘肽的方法,其特征在于:所述基因工程菌的宿主菌為細菌、酵母或霉菌。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的合成谷胱甘肽的方法,其特征在于:所述細菌為大腸桿菌、枯草桿菌、假單胞菌中的一種或幾種,所述酵母為釀酒酵母、巴斯德畢赤酵母、多形漢遜酵母中的一種或幾種,所述霉菌為米曲霉或黑曲霉。
10.一種利用權(quán)利要求1所述的雙功能谷胱甘肽合成酶合成谷胱甘肽的方法,其特征在于:由培養(yǎng)豬胸膜肺炎放線桿菌、琥珀酸放線桿菌、蠟狀芽孢桿菌、血鏈球菌、格氏鏈球菌、乳房鏈球菌和嗜熱鏈球菌或培養(yǎng)表達豬胸膜肺炎放線桿菌、琥珀酸放線桿菌、蠟狀芽孢桿菌、血鏈球菌、格氏鏈球菌、乳房鏈球菌和嗜熱鏈球菌gshF的基因工程菌發(fā)酵產(chǎn)生。
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