[發(fā)明專利]一種碳化后的墨魚骨在骨科中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910195986.1
• 申請日: 2009-09-21
• 公開（公告）號: CN101934087A
• 公開（公告）日: 2011-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭兆祥;李亞屏;湯亭亭;許海平;李星
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院;寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院
• 主分類號: A61L27/02
• 分類號: A61L27/02;A61L27/56
• 代理公司: 上海申蒙商標(biāo)專利代理有限公司 31214
• 代理人: 周豐

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)材料應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，是關(guān)于一種碳化后的墨魚骨在骨科中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】

骨移植是臨床上僅次于輸血的一種常見組織移植，在骨科被廣泛用于填充因感染、腫瘤、創(chuàng)傷所致的骨缺損、骨折不愈合、關(guān)節(jié)及脊柱融合。自體骨移植是治療骨缺損的金標(biāo)準(zhǔn)，但其來源有限及取骨時(shí)會導(dǎo)致供區(qū)并發(fā)癥，因此找尋新的骨移植替代物，或利用組織工程技術(shù)進(jìn)行骨缺損修復(fù)是當(dāng)前國內(nèi)外的研究熱點(diǎn)和主攻方向。在骨組織工程的三大要素細(xì)胞、載體和生長因子中，生物材料支架作為細(xì)胞和因子的載體，無疑在其中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。

墨魚骨(Cuttlebone)為海洋軟體動物墨魚結(jié)構(gòu)獨(dú)特的骨骼，具有與其海洋漂浮習(xí)性相適應(yīng)的、良好的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，可懸浮于水，成分為碳酸鈣(文石型晶狀)，與骨的自然成份和結(jié)構(gòu)比較接近，因此理論上具有良好的骨傳導(dǎo)性能；有文獻(xiàn)報(bào)道在祖國傳統(tǒng)醫(yī)藥中，墨魚骨常被用作創(chuàng)面止血的中藥。但是關(guān)于墨魚骨是否可以作為骨科醫(yī)學(xué)材料，未見文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種碳化后的墨魚骨的新用途。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，所采取的技術(shù)方案：一種碳化后的墨魚骨，在制備治療骨缺損、骨腫瘤及囊腫疾病醫(yī)學(xué)材料中的應(yīng)用。

所述的醫(yī)學(xué)材料是骨組織工程支架材料。

所述的醫(yī)學(xué)材料是骨移植替代物材料。

所述的碳化后的墨魚骨是經(jīng)微波碳化后的墨魚骨或加熱碳化后的墨魚骨。

本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)在于：碳化后獲得的墨魚骨具有良好的微孔結(jié)構(gòu)及生物相容性，有利于成骨細(xì)胞黏附生長，并在一定程度上促進(jìn)成骨分化。微波碳化的墨魚骨可作為骨組織工程支架材料及骨移植替代物材料。有望用于臨床治療及修復(fù)骨缺損，填充腫瘤及囊腫切除后的死腔，促進(jìn)脊柱及關(guān)節(jié)融合，作為細(xì)胞的載體在體外復(fù)合構(gòu)建組織工程化骨。

作為一種海洋動物的骨骼，墨魚骨內(nèi)部含有的有機(jī)質(zhì)可能具有一定的免疫原性及微生物，因此我們本發(fā)明選擇微波碳化的方法來對其進(jìn)行初步處理，以提高其臨床應(yīng)用的安全性。

【附圖說明】

附圖1是微波碳化墨魚骨的掃描電鏡圖，a是×50低倍下的表面形貌，b是×500中倍下的表面形貌c是×2000高倍下的表面形貌。

附圖2是微波碳化墨魚骨表面hMSCs黏附增殖的掃描電鏡圖，其中a為細(xì)胞接種后6h，b為細(xì)胞接種后3d，c為細(xì)胞接種后10d。

附圖3是hMSCs培養(yǎng)14d后堿性磷酸酶染色，a為DMEM成骨誘導(dǎo)液培養(yǎng)組，b為墨魚骨DMEM成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基浸提液培養(yǎng)組。

【具體實(shí)施方式】

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明提供的的具體實(shí)施方式作詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

一，材料和方法

(一)本實(shí)驗(yàn)所需的材料和設(shè)備

材料：購買新鮮活的墨魚短期于-80℃凍存72h，DMEM培養(yǎng)基(美國GIBCO公司)，胰蛋白酶(美國SIGMA公司)，胎牛血清(美國HYCLON公司)，其他試劑均為市售分析純試劑。

儀器：格蘭仕G8023YSP-BM1微波爐(公里800W，容積23L，中國)，超凈工作臺(BIO-HAZARD，VCM-420，中國臺灣)，電子分析天平(METTLER?TOLEDO，AB204-E，瑞士)，電磁攪拌器(STUART，SM24，英國)，低溫離心機(jī)(UNIVERSAL，32R，HETTICH，德國)，掃描電子顯微鏡(SEM，JEOL，JSM-6260LV，日本)。

材料處理

從新鮮冰凍的墨魚中取出墨魚骨，放入雙氧水浸泡30分鐘后蒸餾水沖盡，酒精浸泡保存，除去其外殼后微波干燥后截成2.5mm×2.5mm×3mm圓柱體，再次蒸餾水沖盡，微波干燥滅菌并碳化有機(jī)質(zhì)。

(二)墨魚骨微孔結(jié)構(gòu)觀察

分別取5個(gè)微波處理前后樣本，臨界點(diǎn)干燥，噴金。在掃描電子顯微鏡(JEOL?JSM-6360LV，日本)下觀察并拍照。主要觀察墨魚骨的多孔結(jié)構(gòu)，包括孔徑和連通孔徑的大小、孔隙率等。

(三)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)