[發(fā)明專利]一種具有抗腫瘤作用的紅豆杉多糖的制備方法及其用途無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910192993.6 | 申請日： | 2009-10-12 |
| 公開（公告）號： | CN101735330A | 公開（公告）日： | 2010-06-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 于榮敏;原菲 | 申請（專利權(quán)）人： | 于榮敏 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00;C12S3/02;A61P35/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 510632 廣東省廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 具有 腫瘤 作用 紅豆杉 多糖 制備 方法 及其 用途 | ||
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種紅豆杉多糖的制備方法，具體的說是一種具有抗腫瘤作用的紅豆杉多糖的制備方法及其用途。
技術(shù)背景：
紅豆杉是當前世界上研究最熱門的藥用植物之一，現(xiàn)在圍繞紅豆杉的化學成分所作的研究當中，絕大多數(shù)集中在紫杉烷類化合物的研究上，對非紫杉烷類化合物，特別是對大極性成分之一——多糖的關(guān)注相對較少。多糖本身是一種重要的生物活性物質(zhì)，具有廣泛的藥理活性，從多糖組分著手，尋找紅豆杉中其它具有優(yōu)良生物活性的成分，是一個極具潛力的研究領(lǐng)域，多糖研究已成為天然藥物學和保健食品學的研究熱點問題之一，它既是尋找天然活性藥物分子的有效途徑，也是保健食品功能因子的研究項目之一。
發(fā)明內(nèi)容：
本發(fā)明的目的是提供一種具有腫瘤治療作用的中草藥有效部位——紅豆杉多糖的制備方法與其藥物應用。通過該制備方法制備得到的紅豆杉多糖以苯酚-硫酸法測得總多糖＞90％，以凱式定氮法測定，其含氮量＜1％，分子量分面范圍為：12.9KDa-74.5KDa。所制備的紅豆杉多糖可制成軟膏、凝膠、片劑、膠囊、軟膠囊、口服液、糖漿劑、滴丸、注射劑等制劑。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下：
一種具有腫瘤治療作用的中草藥有效部位——紅豆杉多糖的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
1)脫脂
粉碎的紅豆杉干燥枝葉，以有機溶劑脫脂，將脫脂過的原料晾干，揮發(fā)除去有機溶劑。
2)提取
加入蒸餾水提取，水提取液過濾后，離心取上清液。上清液濃縮，將濃縮的水提取液用乙醇調(diào)節(jié)至含醇量為70％，低溫靜置過夜后離心，取沉淀，用水復溶，冷凍結(jié)冰后，凍干。
3)除蛋白
將凍干的提取物用水重新溶解后，使用Sevag法或酶解法除蛋白。
4)除有機溶劑
除蛋白后的溶液裝入透析袋進行透析以除去殘留的有機溶劑。透析后的多糖溶液濃縮后冷凍干燥得到粗多糖。
根據(jù)上述制備方法，其特征在于更為具體的步驟為：
1)脫脂
粉碎的紅豆杉干燥枝葉，以有機溶劑脫脂，將脫脂過的原料晾干，揮發(fā)除去有機溶劑。
2)提取
加入蒸餾水提取，水提取液過濾后，離心取上清液。清液減壓濃縮，將濃縮的水提取液用乙醇調(diào)節(jié)至含醇量為70％，低溫靜置過夜后離心，取沉淀，用水復溶，冷凍結(jié)冰后，凍干。
3)除蛋白
將凍干的提取物用水重新溶解后，使用Sevag法或酶解法除蛋白。
4)除有機溶劑
除蛋白后的溶液裝入透析袋進行透析以除去殘留的有機溶劑。透析后的多糖溶液濃縮后冷凍干燥得到粗多糖。
以本發(fā)明所提供的制備方法簡單，適于工業(yè)化生產(chǎn)，通過該制備方法制備得到的紅豆杉多糖以苯酚-硫酸法測得總多糖＞90％，以凱式定氮法測定，其含氮量＜1％，分子量范圍為12.9KDa-74.5KDa，經(jīng)過體內(nèi)外試驗證明其具有很好的抗腫瘤作用，可在制備治療各種腫瘤的藥物中應用?？筛鶕?jù)需要制成軟膏、凝膠、片劑、膠囊、軟膠囊、口服液、糖漿劑、滴丸、注射劑等制劑。
具體實施方式：
實施例1：紅豆杉多糖的提取
取紅豆杉干燥枝葉200g，粉碎后過20目篩，使用石油醚∶乙酸乙酯(1∶1)除脂后，在80℃進行熱水提取，按照1∶3加入無水乙醇，在4℃醇沉24小時后，離心取沉淀，復溶后使用Sevag法除蛋白，將除蛋白后的糖溶液透析后凍干，得到紅豆杉多糖26.04g，為淺褐色，產(chǎn)率為13.02％。取提取得到的紅豆杉多糖，按照苯酚-硫酸法測定其糖含量，測定結(jié)果為93.2％，測得紅豆杉多糖的分子量分布為12.9KDa-68.5KDa。
實施例2：紅豆杉多糖的提取
取紅豆杉干燥枝葉200g，粉碎后過20目篩，使用石油醚∶乙酸乙酯(1∶1)除脂后，在90℃進行熱水提取，按照1∶3加入無水乙醇，在4℃醇沉24小時后，離心取沉淀，復溶后使用酶解法除蛋白，將除蛋白后的糖溶液透析后凍干，得到紅豆杉多糖25.48g，產(chǎn)率為12.74％。取提取得到的紅豆杉多糖，按照苯酚-硫酸法測定其糖含量，測定結(jié)果為91.24％。取紅豆杉多糖，按照凝膠排阻色譜的方法測定多糖的分子量分布。測得紅豆杉多糖的分子量分布為14.5KDa-74.5KDa。通過凱式定氮測定紅豆杉多糖的含氮量為0.856％。
實施例3：紅豆杉多糖的提取
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