[發(fā)明專利]一種香豆素類化合物及其制備方法和應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910192775.2
• 申請日: 2009-09-28
• 公開（公告）號: CN101693715A
• 公開（公告）日: 2010-04-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧虹珠;陳艷;易延逵
• 申請（專利權(quán)）人: 南方醫(yī)科大學
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04;A61K31/37;A61P27/02;A61P39/06
• 代理公司: 廣州市天河廬陽專利事務(wù)所 44244
• 代理人: 胡濟元

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及有機化學領(lǐng)域，具體涉及一種雜環(huán)化合物。

背景技術(shù)

香豆素，又稱雙呋喃環(huán)和氧雜萘鄰?fù)⑽拿Q為coumarin，是一種重要的香料，天然存在于黑香豆、香蛇鞭菊、野香莢蘭和蘭花中。香豆素的衍生物有些存在于自然界，有些則可通過合成方法制得；有的游離存在，有的與葡萄糖結(jié)合在一起，其中不少具有重要經(jīng)濟價值。

香豆素類化合物是指鄰羥基桂皮酸的內(nèi)酯，具有芳香氣味。該類化合物按其母核結(jié)構(gòu)可分為簡單香豆素類、呋喃香豆素類、吡喃香豆素類三種類型，主要分布在傘形科、豆科、菊科、蕓香科、茄科、瑞香科、蘭科等植物中。香豆素類化合物是生藥中的一類重要的活性成分，如補骨脂內(nèi)酯(psolalen)具有光敏活性作用，用于治療白斑病；奧斯腦(osthole)是來源于蛇床子和毛當歸的一種香豆素類活性成分，具有抑制乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的藥理活性；海棠果內(nèi)酯(calophylloide)具有很強的抗凝血作用；濱蒿內(nèi)酯(scoparon)是生藥茵陳蒿平肝利膽、松弛平滑肌的主要活性成分。目前尚未發(fā)現(xiàn)具有治療視網(wǎng)膜病變和抗氧化作用的香豆素類化合物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種具有治療視網(wǎng)膜病變和抗氧化作用的香豆素類化合物。

本發(fā)明實現(xiàn)上述目的的技術(shù)方案是：

一種香豆素類化合物，其分子結(jié)構(gòu)如式I所示。

本發(fā)明所述的香豆素類化合物首次分離于細梗胡枝子[Lespedeza?virgata(Thurb)DC]，分子式為C₂₁H₁₉O₈，分子量為399，常溫常壓下為黃色無規(guī)則粉末。

本發(fā)明所述的香豆素類化合物可從細梗胡枝子全草中分離得到，具體的方法為：

(1)將干燥的細梗胡枝子全草粉碎后，用95％乙醇滲漉提取，回收提取液中的乙醇得到浸膏，所得浸膏先用石油醚萃取，取水相，再用氯仿萃取，取水相，然后用乙酸乙酯萃取，取水相，最后用正丁醇萃取，取正丁醇部分；

(2)將正丁醇部分經(jīng)正向硅膠柱，依次用體積比分別為98∶2、95∶5、9∶1的氯仿和甲醇混合物梯度洗脫，收集氯仿和甲醇體積比為95∶5的洗脫液，再經(jīng)ODS反向柱層析，依次用濃度為30％、50％和60％的甲醇梯度洗脫，收集50％甲醇的洗脫液，最后經(jīng)Sephadex?LH-20柱層析，用純甲醇洗脫，洗脫液經(jīng)層析條件為氯仿∶甲醇＝95∶5、碘顯色的薄層層析檢測，取薄層層析后碘顯色為藍黑色的洗脫液，除去甲醇得到黃色結(jié)晶即可。

本發(fā)明所述的香豆素類化合物具有治療視網(wǎng)膜病變和抗氧化作用，可用于制備治療視網(wǎng)膜病變的藥物，該藥物由質(zhì)量百分比為0.1～10％的權(quán)利要求1所述的化合物和90～99.9％的藥用輔料組成，可以是注射劑、口服片劑、膠囊等。

為了更好地理解本發(fā)明，下面將通過動物實驗來證明本發(fā)明具有的技術(shù)效果。

(一)本發(fā)明化合物治療大鼠糖尿性視網(wǎng)膜病變

1.糖尿性視網(wǎng)膜病變大鼠模型的制備

1)實驗動物：健康、雌雄各半、清潔級SD大鼠，體重(200±20)g，由南方醫(yī)科大學動物中心提供。

2)糖尿性視網(wǎng)膜病變模型的誘發(fā)：大鼠按體重150mg/kg一次性腹腔注射四氧嘧啶，3日后尾靜脈取血，血糖≥16.7mmol/L為造模成功。

2.治療試驗采用下述實施例2的片劑

1)給藥方法：造模一周后開始給藥，本發(fā)明治療組以實施例2所述的注射劑以2mg/kg劑量每日一次腹腔注射，模型組與對照組以等容的生理鹽水每日一次腹腔注射。

3.觀察項目及方法

1)標本取材及切片制作：各組動物10周后股動脈取血處死，取眼球于10％中性甲醛固定后常規(guī)脫水、浸蠟、包埋，將眼球沿縱向取視網(wǎng)膜切片，切片厚7μm。

2)DUTP缺口末端標記(TUNEL)法檢測細胞凋亡：凋亡指數(shù)以凋亡細胞占同一視野細胞總數(shù)的百分比表示，計數(shù)方法以每張玻片高倍鏡下隨機選五個視野計數(shù)。凋亡指數(shù)＝細胞凋亡數(shù)/細胞總數(shù)×％。

4.結(jié)果

正常大鼠視網(wǎng)膜未凋亡細胞，治療組可見視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡，內(nèi)核層偶見凋亡，模型組神經(jīng)節(jié)細胞層及內(nèi)核層均見大量凋亡細胞陽性表達，外核層也可見凋亡細胞。治療組與模型組與正常組比較，凋亡細胞數(shù)均明顯增加，具有顯著差異(P＜0.01)，治療組與模型組相比，凋亡細胞明顯減少，差異顯著(P＜0.0)見表1。

表1各組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞凋亡指數(shù)(x±s)