[發明專利]一種波士頓蕨類種苗組織培養的繁殖方法

無效

• 申請號: 200910192720.1
• 申請日: 2009-09-25
• 公開（公告）號: CN101702999A
• 公開（公告）日: 2010-05-12
• 發明（設計）人: 金劍平;文方德;巫仕榮;徐紅;黃皚冰;姚慧芬
• 申請（專利權）人: 珠海市園藝研究所;珠海諾德生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 王賢義

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別涉及一種波士頓蕨類種苗組織培養的繁殖方法。

背景技術

波士頓蕨，學名：Nephralepis?exaltata?cu.Bastaniensis，英文名：Boston?fern。原產地：美國。腎蕨科，株矮，簇生型。波士頓蕨是碎葉腎蕨的突變種，后來聲名卻凌駕于碎葉腎蕨之上。此種蕨類的適應力極強，生長容易，因而大受歡迎。不論庭園造景、居家綠化還是插花藝術，波士頓蕨都被廣泛運用，可謂最生活化的蕨類。以前采用的分株進行繁殖的方法，一棵波士頓蕨類一年只能繁殖出6～8棵，因其繁殖系數低，遠不能滿足市場的需要。或者采用孢子繁殖方法，但因采集孢子困難，造成孢子不純凈，由此所造成的波士頓蕨類種苗變異高，不整齊等原因，不能滿足市場的需要。因此，目前波士頓蕨類的繁殖方法有些品種就采用組織培養法，它是一種利用植物細胞的全能性，離體培養植物組織小塊，進行植物無性快速繁殖的工廠化育苗技術，具體工藝是：切下波士頓蕨類的根須，先誘導出愈傷組織，再分化出不定芽，再培育成可以移栽馴化的壯苗。一般情況下此過程需要6～8個月以上，而且需要較高的生產成本(包括培養基成本和培養條件耗費)等，所以現有的波士頓蕨類種苗繁殖技術仍存在以下缺陷：繁殖速度慢，成本較高。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術的不足，提供一種繁殖速度快、成本低的波士頓蕨類種苗組織培養的繁殖方法。

本發明所采用的技術方案是：本發明包括以下步驟：

(a)芽的誘導和分化步驟：取波士頓蕨類的根須作為外植體，將所述外植體放入加有3％的白糖水的MS培養基中培養，分化出圓球莖，培養溫度為24～26度，光照強度為1800～2500lux，光照時間為每天10～14小時；

(b)無菌苗的增殖培養步驟：取所述圓球莖放入0.25～0.8mg/L的6-芐氨基嘌呤(6BA)、糖為3％、0.25～0.8mg/L激動素(KT)的MS培養基中增殖培養，培養溫度為24～28度，光照強度為2000～3000lux，光照時間為每天10～14小時；

(c)無菌苗的馴化移栽步驟：將所述圓球莖放入0.5～1.5mg/L的3-吲哚丁酸(3IBA)、糖3％的MS培養基中培養，培養成可進行移栽馴化的植株，培養溫度為18～28度，弱光條件。

所述波士頓蕨類的根須作為外植體之前需要經過消毒處理，消毒處理是指將所述根須先用75％的酒精處理，再用0.1％的升汞溶液浸泡后取出，然后用無菌水沖洗4～5次。

所述酒精處理時間為8～12秒，所述升汞溶液浸泡時間為8～12分鐘。

本發明的有益效果是：由于本發明將波士頓蕨類根須放入加有3％的白糖水的MS培養基中培養，不加瓊脂，所以可以有效促進波士頓蕨類根須快速分化出圓球莖；又由于本發明采用0.25～0.8mg/L的6-芐氨基嘌呤(BA)，糖為3％，0.25～0.8mg/L的激動素(KT)的MS培養基作為增殖培養基，所以圓球莖能旺盛增殖；最后圓球莖置于0.5～1.5mg/L的3-吲哚丁酸(IBA)，糖3％的MS培養基中培養，圓球莖四周即可快速生根.本發明通過直接誘導出圓球莖，圓球莖又直接快速增殖減少了愈傷組織的誘導這一步驟，簡化培養條件或培養方式等工藝，可以降低生產成本，提高商品化生產的效率和利潤，因此本發明的波士頓蕨類種苗的繁殖方法繁殖速度快，成本低.

具體實施方式

實施例一：

(一)芽的誘導和分化步驟：取波士頓蕨類植物的根須作為外植體；將所述根須先用75％的酒精處理8秒，再在0.1％的升汞溶液中浸泡8分鐘取出，然后用無菌水沖洗4次；取經升汞溶液消毒后的所述根須切成1cm的小段，放入加有3％的白糖水的MS培養基中培養，不加瓊脂；培養溫度為24～26度，光照1800lux，光照時間每天10小時，培養6周后，可見根須兩端分化出圓球莖。

(二)無菌苗的增殖培養

取所述圓球莖切碎后撒鋪于加有0.25mg/L的6-芐氨基嘌呤(BA)，糖為3％，0.25mg/L的激動素(KT)的MS培養基中，培養六周后，每個圓球莖可多分化出5個新的圓球莖；培養溫度要求：24～28度，光照2000lux，每天光照10小時。

(三)無菌苗的馴化移栽