[發明專利]一種華貴櫛孔扇貝橙黃殼色分子標記及其鑒定方法和試劑盒

有效

• 申請號: 200910192544.1
• 申請日: 2009-09-22
• 公開（公告）號: CN101712992A
• 公開（公告）日: 2010-05-26
• 發明（設計）人: 何毛賢;袁濤;黃良民
• 申請（專利權）人: 中國科學院南海海洋研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛

技術領域

本發明涉及水生生物基因工程領域，具體涉及貝類殼色分子標記和遺傳鑒 定技術，尤其涉及一種華貴櫛孔扇貝橙黃殼色分子標記及其鑒定方法和試劑 盒。

背景技術

在漫長的人類歷史中，人們常常著迷于貝殼絢麗的色彩和豐富的形態。 殼色的多態性往往與許多其他的生物學特征有著緊密的聯系，例如：生物化學 特性、遺傳特征、遺傳漂變、定向選擇、頻率制約選擇等(Jones?et?al.，1977； Legates?and?Warwick，1990；Hedegaard?et?al.，2006)，因此，這一特性也一直吸 引著生物學家的關注。

根據許多實驗的交叉數據顯示，軟體動物的殼色變化是遵循遺傳學規律 的(David?and?Leslie，1977；Kraeuter?et?al.，1984；Adamkewicz?and?Castagna， 1988)。關于殼色多態性的研究報告指出，殼色的基本遺傳原理相對比較簡單， 殼色的多態是由一或兩個顯性位點所控制(Innes?and?Haley，1977；Palmer，1985； Ekendahl?and?Johannesson，1997；Yusa，2004)，而更加精細的多態表型則可能由 相對更復雜的遺傳系統所控制(Peignon?et?al.，1995；Winkler?et?al.，2001)。

海灣扇貝、牡蠣、鮑和馬氏珠母貝的殼色作為一個可見的遺傳標記已經 應用于遺傳育種中。Gary等(1980)對貽貝Mytilus?edulis不同殼色群體進行 雜交實驗，形成的分離家系的研究中，發現兩個群體間的殼色多態性存在相當 頻率的差異，并且在不同群體間棕色個體比藍色個體要小10～20％。日本馬氏 珠母貝Pinctada?fucata?martensii的殼色有褐色(最常見)、紅色、黃色和白色 四種，野生和養殖群體里白色貝非常稀少，曾在一些自交群體里發現過白色個 體(Wada，1986a，1986b)。白殼色性狀有可能是由隱性基因控制的。鄭懷平 等(2003)建立了不同殼色海灣扇貝Argopecten?purpuratus家系，并在此基礎 上獲得了部分紅殼色海灣扇貝，通過自交、雜交和定向選育方法培育出不同顏 色的海灣扇貝，建立了海灣扇貝“殼色-數量性狀復合選擇和自交-定向選育 -小群體平衡”的育種模式。

有關貝類殼色的研究主要是關于其多態性的或培育新品種，殼色性狀相關 的分子標記的研究還非常少，Qin等(2007a，2007b)采用AFLP分子標記， 構建了海灣扇貝的殼色連鎖遺傳圖譜，有助于研究殼色遺傳的理論依據，并且 有助于通過選擇育種得到特定的殼色品種。

華貴櫛孔扇貝(Chlamys?nobilis)是一種被熟知的擁有豐富亮麗殼色的重 要海洋水產貝類。其主要殼色有亮黃色、橙黃色、黃褐色、淺紫褐色、紫色、 赭色、淡紅色等。而在養殖生產中，殼色性狀時常是一項重要的選育指標。不 同的殼色的扇貝在商品市場上的價格也有差異，顏色漂亮的往往能有更高的經 濟價值。然而，有關扇貝華貴櫛孔扇貝殼色特異分子標記及其遺傳鑒定的分子 生物學技術，目前國內外都未見報道。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種華貴櫛孔扇貝橙黃殼色 分子標記。

本發明的另一個目的在于提供一種利用上述華貴櫛孔扇貝殼色分子標記 鑒定華貴櫛孔扇貝殼色的方法。

本發明的另一個目的在于提供一種華貴櫛孔扇貝遺傳鑒定試劑盒。

本發明的上述目的是通過如下方案予以實現的：

一種華貴櫛孔扇貝橙黃殼色分子標記，該分子標記的核苷酸序列如SEQ ID?NO：1所示。

上述華貴櫛孔扇貝橙黃殼色分子標記的篩選方法采用本領域技術人員所 常用的AFLP分析方法，包括如下步驟：

(1)華貴櫛孔扇貝基因組DNA的制備；

(2)采用AFLP分析方法對步驟(1)制備的基因組DNA進行分析：

對步驟(1)制備所得DNA模板依次進行酶切、連接、預擴增、選擇性 擴增和電泳分析；