[發明專利]一種抗睪丸hTSC29蛋白的抗體或抗體片段及其應用

無效

• 申請號: 200910188640.9
• 申請日: 2009-12-02
• 公開（公告）號: CN101775371A
• 公開（公告）日: 2010-07-14
• 發明（設計）人: 唐愛發;顏秋霞;桂耀庭;蔡志明
• 申請（專利權）人: 唐愛發;顏秋霞;桂耀庭;蔡志明
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/18;G01N33/577;G01N33/53;A61K39/395;A61K47/48
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281
• 代理人: 向武橋

技術領域

本發明是關于一種用于男性不育癥檢測的抗體或抗體片段及其應用。

背景技術

在全世界范圍內，大約15％的夫婦受到不育癥的影響，其中男性不育 癥已經成為一個主要的生殖健康問題。隨著社會工業化程度的提高和生活 節奏的加快，加上環境污染和不良生活習慣等因素，男性精液質量日趨下 降，男性不育人數呈逐年上升趨勢，男性生殖健康的問題越來越受到全社 會的關注。精子發生是一個復雜的過程，它分為精原細胞有絲分裂、精母 細胞減數分裂和精子形成三個階段。體內這一獨特的生命現象，需要一系 列睪丸特異性表達基因的參與，各自發揮著特定的功能。目前已知一些基 因與精子發生密切相關，例如CREM，Ddrl，TESP-1等皆被證明為睪丸 特異性表達基因并在精子發生過程中起重要作用，這些基因的缺失或突變 將導致嚴重少精子癥或無精子癥，從而造成不育。因此，篩選和鑒定生精 相關基因有助于進一步了解人類精子形成的分子機制和部分男性不育的原 因。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，提供一種能夠用于男性不育癥檢測的 抗睪丸hTSC29蛋白的抗體或抗體片段及其應用。

為解決上述技術問題，本發明提供一種分離的雜交瘤細胞株，其保藏 號為CCTCC?NO：C200952。

一種由雜交瘤細胞株hTSC29分泌的抗體或抗體片段。

進一步的，抗體或抗體片段為特異性結合抗睪丸hTSC29蛋白的抗體 或抗體片段。該雜交瘤細胞株hTSC29也可以分泌出能夠特異性結合其它 蛋白的抗體或抗體片段。

進一步的，抗體為特異性結合hTSC29蛋白的多克隆抗體或單克隆抗 體。

進一步的，單克隆抗體為IgG，亞類為IgG2b(κ)。

一種抗睪丸hTSC29蛋白的抗體或抗體片段的應用，所述抗體或抗體 片段與耦聯物耦聯，所述耦聯物為酶、熒光標記物、化學發光標記物或藥 物。

一種抗睪丸hTSC29蛋白的抗體或抗體片段復合物，包括抗睪丸 hTSC29蛋白的抗體或抗體及與其耦聯的耦聯物，所述耦聯物選自標記物、 藥物。

所述標記物為酶、熒光標記物或化學發光標記物。

一種藥物組合物，包括藥學上有效量的抗睪丸hTSC29蛋白的抗體或 抗體片段及藥學上可接受的載體。

一種抗睪丸hTSC29蛋白的抗體或抗體片段在男性不育檢測上的應 用。

本發明的有益效果是，申請人篩選出一個人睪丸特異性基因hTSC29， 根據同源性、抗原性、親水性等參數預測的結果進行綜合考慮，最后選取 hTSC29的224-241位氨基酸序列進行合成。經小鼠免疫、細胞融合、篩選 及克隆化，獲得了能穩定分泌抗hTSC29?mAb的雜交瘤細胞株，Western?blot 鑒定表明，該mAb在人正常睪丸蛋白中相對分子質量(M_r)約為60kDa 處檢測到特異條帶；免疫組織化學顯示hTSC29蛋白主要在正常人睪丸的 精母細胞及圓形精子細胞中表達，此抗體效價高、特異性強，為進一步研 究與hTSC29基因表達相關的男性不育癥提供了特異的檢測工具。

附圖說明

圖1是Western?blot檢測hTSC29?mAb的特異性圖，其中，字符1代 表人子宮內膜細胞，2代表白血病細胞，3代表人睪丸組織，GAPDH作為 內參；

圖2是hTSC29的免疫組化定位圖，箭頭所指是hTSC29蛋白質，免 疫組化結果顯示，hTSC29?mAb所識別的分子主要定位在正常人睪丸組織 的精母細胞及精子細胞，A為陰性對照；

圖3是免疫熒光染色技術檢測hTSC29蛋白在睪丸組織中的表達圖， 其中，A為陰性對照，B為hTSC29蛋白在人睪丸組織中的定位(箭頭所 指)。

具體實施方式