[發明專利]一種過氧化物酶體增殖物激活受體-γ的天然激活劑

有效

• 申請號: 200910187817.3
• 申請日: 2009-09-30
• 公開（公告）號: CN101690726A
• 公開（公告）日: 2010-04-07
• 發明（設計）人: 劉慶平;李文哲;劉媛媛
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: A61K31/575
• 分類號: A61K31/575;A61P9/10
• 代理公司: 大連八方知識產權代理有限公司 21226
• 代理人: 高杰

技術領域

本發明涉及生物工程領域，具體涉及一種過氧化物酶體增殖物激活受體-γ的天然激活劑。

背景技術

在動脈粥樣硬化中起重要作用的ox-LDL能夠激活PPAR-γ轉錄活性，誘導ABCA1和 ABCG1的表達(PPARγ-LXR-ABCA1途徑)[Hou?et?al.，Cell?Biochem?Funct，2007，25：33-44]， 從而促進膽固醇的流出。ox-LDL部分脂類成分及衍生物，如9-HODE和13-HODE[Itoh?et?al.， Nat?Struct?Mol?Biol，2008，15：924-931]，已證實是PPAR-γ的天然配體，能夠調節動脈粥樣硬化 的發生與發展，下式A為各種PPAR天然配體的結構式：

OxLig-1是ox-LDL的活性成分，OxLig-1在動脈粥樣硬化中對PPAR-γ的影響仍未見報 道。

PCT/JP02/00723專利公開了利用氫譜和碳譜分析法對OxLig-1進行結構分析。¹H-NMR (500MHz，CDCl₃)結果顯示：δ＝5.708(s，¹H，H-6)，4.732-4.712(m，¹H，H-3)；¹³C-NMR (500MHz，CDCl₃)結果顯示：δ＝202.03，179.03，173.01，164.05，126.89，72.04，54.88， 50.04，49.89，45.47，43.18，39.52，38.74，36.23，36.06，28.84，28.54，28.01，24.89，24.61， 23.87，22.80，18.91，17.29。¹³C-NMR表明壬二酸與7-KC發生了酯化反應。¹H-NMR中， 7-KC上與羥基相連的碳上氫原子的化學位移發生變化(δ＝4.732-4.712)，也說明發生了酯化 反應。雖然氫譜和碳譜分析法確定了OxLig-1氫和碳的具體位置，但該方法很難確定PPAR 激活劑OxLig-1羧基(-COOH)的羥基。

發明內容

本發明的目的是要證實OxLig-1具有PPAR天然配體共有的羧基結構，并且通過化學及 生物學方法闡明OxLig-1激活PPAR-γ的作用機制。

本發明的技術方案是：一種過氧化物酶體增殖物激活受體-γ的天然激活劑，OxLig-1具 有PPAR天然配體共有的羧基結構，是PPAR-γ的天然配體，下式B為OxLig-1的結構式：

從B中可以看出OxLig-1具有PPAR天然配體共有的羧基。

OxLig-1激活PPAR-γ的作用機制如下：

一、OxLig-1具有PPAR天然配體共有的羧基結構：

進行7-酮基膽甾醇-9-羧基壬烷(7-ketocholesteryl-9-carboxynonanoate，OxLig-1)化學結構 分析的紅外色譜法。由紅外光譜圖看出，在3449cm^-1處，有一羧基的羥基峰，證明OxLig-1 具有PPAR天然配體共有的羧基結構。

二、OxLig-1是PPAR-γ的天然配體：

利用AutoDock?3.0軟件包對受體PPAR-α/γ和OxLig-1分子進行半柔性對接。分子對接中 PPAR-α/γ與OxLig-1分子按1∶1比例結合。在進行半柔性對接模擬前，使用AUTOGRID計 算網格，每一次對接所用的網格長、寬和高均為100個網格點，網格包含OxLig-1分子可能 作用的所有活性氨基酸殘基，距離設定為0.0375nm。模擬對接過程中PPAR-α/γ結構視為剛 性，OxLig-1分子為柔性，OxLig-1分子內的旋轉鍵由AUTOTORS程序識別并可以在搜索過 程中任意旋轉，分子對接在AutoDock軟件包中進行，對接使用Lamarchian遺傳算法與局部 能量搜索相結合(GALS)對PPAR-α/γ-OxLig-1復合物構象進行搜索。每一次均進行了100 次對接計算，最終的計算結果從軟件生成的輸出文件中抽提出來。結果的選擇同時考慮聚類 分析(Clustering?Analysis)的結果和AUTODOCK軟件自帶的AMBER評分函數打分的高低。 根據對接作用能大小和幾何匹配情況，對100個對接參考結構進行篩選，選擇最優結合構象。