[發明專利]反膠束提取菜籽蛋白的后萃方法

無效

• 申請號: 200910184477.9
• 申請日: 2009-08-17
• 公開（公告）號: CN101619098A
• 公開（公告）日: 2010-01-06
• 發明（設計）人: 王立峰;朱均旺;袁建;鞠興榮;何榮
• 申請（專利權）人: 南京財經大學
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C07K1/14
• 代理公司: 南京天翼專利代理有限責任公司
• 代理人: 王玉梅

技術領域

本發明涉及一種反膠束提取菜籽蛋白的后萃方法。

背景技術

油菜是我國大面積生產的一種油料作物，產量居世界第一位。菜籽油加工過程中產生的 副產品量巨大，僅菜籽粕產量，每年就超過1000萬噸。菜籽粕中含有35％～42％的粗蛋白質， 并且菜籽蛋白中賴氨酸、胱氨酸和蛋氨酸的含量較高，氨基酸平衡優于大豆蛋白，是一種植 物蛋白來源。

目前以菜籽或菜籽粕為原料，生產菜籽蛋白的方法主要有水相法，水相酶解法，有機溶 劑萃取，超濾、滲濾法等方法。水相法在工業生產中往往蛋白提取率較低，還有廢水不易處 理，易造成環境污染等問題；水相酶解法雖然提高了菜籽蛋白的提取率，但降低某些蛋白功 能性質和營養價值；用醇、酮等有機溶劑制備菜籽蛋白的方法，因工藝復雜、成本高以及溶 劑對蛋白質營養價值的影響等問題；而超濾、滲濾法生產的料液中含有蛋白質、果膠等大分 子物質，超濾膜膜面或膜孔很容易被污染，導致超濾膜的處理能力下降甚至不能工作，而且 污染后的清洗工作也相當繁雜，致使超濾技術在工業上的推廣和應用受到極大的限制。

國內外研究者在不段地探索新的蛋白分離技術。反膠束萃取就是在這一背景下發展起來 的新型高效分離技術【李祥村，賀高紅，反膠束萃取蛋白技術的新進展[J].水處理技術，2005.31 (1)7-12.】。許多研究表明反膠束萃取技術作為一項新型的分離技術，在分離提純生物活性 物質方面有很大的優勢。反膠束是表面活性劑在有機溶劑中自發形成的納米尺度的一種聚集 體，在反膠束中，表面活性劑的極性基團部分圍成一個極性核心，稱為水池，這個水池包括 表面活性劑的極性基團內表面和其中的水分，以及溶解于水中的離子等，具有親水性的生物 大分子就可以溶解于水池中的水分而被以膠束的形式萃取出來。反膠束的一個重要參數是它 的含水量W₀，即水池中溶入的水與表面活性劑的摩爾比，它決定反膠束的尺寸。據報道生物 活性物進入反膠束溶液是一種協同過程，即在宏觀兩相(有機相和水相)界面間的表面活性劑 層同鄰近的蛋白質發生靜電作用而變形，接著在兩相界面形成了包含有生物活性物的反膠束， 此反膠束擴散進入有機相，從而實現了萃取分離，此過程稱為前萃。

對于反膠束法提取方法而言，通過前萃工藝得到前萃液固然重要，然而從前萃液中將目 標產物分離出來同樣重要，這個過程通常稱之為后萃。以往的后萃方法一般是將反膠束溶液 和緩沖溶液接觸，調節溶液的pH值、離子強度等因素，使蛋白質轉入水相，實現后萃。

但是采用傳統的后萃方法，一般是用緩沖溶液消耗量大，浪費大量水資源，使反膠束提 取蛋白質的顯著優勢被掩蓋，在后期還要蒸發大量水分，耗費電能；而且，在傳統的后萃過 程中，兩相界面上會產生一種白色復合物。這是因為在后萃過程中，蛋白質會與表面活性劑 作用，變性失活，沉淀在兩相的界面上。這樣，不僅導致蛋白質提取率低，同時也造成表面 活性劑的大量損失。

發明內容

本發明提供一種反膠束提取菜籽蛋白的后萃方法，該方法工藝簡單，蛋白質變性程度大 大減小，蛋白提取率高，表面活性劑的損失顯著降低；節約水資源，并降低工業生產中的能 耗。

所述的反膠束提取菜籽蛋白的后萃方法為：用反膠束溶液提取菜籽蛋白，得到前萃液， 前萃液經真空濃縮，除去反膠束溶液中的有機溶劑后加入緩沖溶液，萃取分離，得到菜籽蛋 白的水溶液。

由于先采用真空濃縮的方式除去前萃液中的絕大部分有機溶劑，然后加入緩沖溶液得到 后萃液，進行后萃，采用該方法，后萃過程中蛋白質變性程度大大減小，表面活性劑的損失 顯著降低；由于預先除去了絕大部分有機溶劑，只需加入少量的緩沖溶液即可實現后萃過程， 不僅蛋白質后萃率高，而且節約水資源，降低后續蛋白質濃縮環節中的能耗，生產成本大大 降低。

用反膠束溶液提取菜籽蛋白的方法如下：將菜籽粕粉加入反膠束溶液中，在超聲波作用 下進行萃取，然后經固液分離得到前萃液。