[發明專利]一種雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征、禽流感四聯滅活疫苗佐劑及其制備方法

有效

• 申請號: 200910180913.5
• 申請日: 2009-10-21
• 公開（公告）號: CN101690810A
• 公開（公告）日: 2010-04-07
• 發明（設計）人: 張勇飛;苗玉和;李尚波;張亞坤;胥桂華;米宏有;高英杰;武潔梅;蔣玉文
• 申請（專利權）人: 張勇飛;遼寧益康生物制品有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61P31/14;A61P31/16;A61P31/20;C08B37/00;A61K39/145;A61K39/17;A61K39/215;A61K39/20;A61K39/295
• 代理公司: 北京萬科園知識產權代理有限責任公司 11230
• 代理人: 張亞軍;夏新

技術領域

本發明涉及一種免疫佐劑，具體涉及一種專門針對雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征、禽流感四聯滅活疫苗的免疫佐劑，及其制備方法。

背景技術

傳統免疫佐劑是通過富集免疫原(如鋁膠)、緩釋免疫原(如油乳劑)、激活單核吞噬細胞遞呈抗原(如卡介苗、細菌脂多糖)以及多種綜合作用(如不完全弗氏佐劑和完全弗氏佐劑)來實現對免疫原的強化免疫和改變免疫途徑的佐劑作用。

動物機體在免疫原的刺激下主要發生哪類免疫反應，主要取決于免疫佐劑激發哪一類輔助T細胞(Th)。Th1主要誘導細胞免疫反應，它通過分泌IL-2、IFN-γ、TNF-b刺激T細胞發揮免疫反應；Th2主要誘導體液免疫反應，它通過分泌IL-4、IL-5、IL-10刺激B細胞發揮免疫反應，產生高水平的循環和分泌型抗體。鋁膠型疫苗誘導的免疫反應90％以上為Th2型，主要產生IgG1和IgA；卡介苗和細菌脂多糖型疫苗誘導的免疫反應為Th1型占主導地位。

Morein首次提出免疫刺激復合物(ISCOM)，它是一個全新的免疫佐劑，由皂苷、膽固醇、磷脂等構成的直徑為30-40nm的球形籠狀顆粒(Cox?JC，SjolanderA，Barr?Ig.ISCOMs?and?other?saponin?based?adjuvants[J].Adv?Drug?Deiv?Rev，1998，32(3)：247-271)。這種佐劑的特征在于通過皂苷高效地將免疫原遞呈給單核巨噬細胞，為免疫應答奠定了強大的基礎。

近年來，中藥免疫佐劑也層出不窮，比如蜂膠免疫佐劑、人參皂苷佐劑(ZL02110578.2)、當歸多糖-內酯復合免疫佐劑(ZL?94115186.7)等等，它們都是利用中藥有效成分激活機體免疫來實現免疫佐劑作用的。

但是，上述這些現有的免疫佐劑效果還不夠理想，一方面是由于這些免疫佐劑在同類疫苗中具有普適性，因而其作用基理缺乏對具體疾病的針對性，不能夠充分地激活基體的免疫；另一方面，這些佐劑在免疫原的加工制作過程中往往不能有效地保護免疫原的生物活性。

基于上述技術背景，我們將以中醫藥歸經原理制成的特定中藥多糖、中藥皂苷添加到免疫原溶液中，不僅利用水化膜原理在免疫原表面形成水化膜，保護了免疫原活性蛋白的的三維立體構象和生物活性，而且能夠更有針對性地激活機體對本類疾病的免疫功能。

發明內容

本發明的目的在于：提供一種新的免疫佐劑，它利用中藥歸經特性不僅能夠針對具體病原充分激活機體免疫，而且能夠更加有效的保護免疫原的生物活性。

本發明的目的還在于：提供所述免疫佐劑的制備方法。

所述發明目的通過以下技術方案實現：

提供一種雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征、禽流感四聯滅活疫苗佐劑，由以下重量份的組分組成：9.5份中藥多糖、0.5份中藥皂苷、30份吐溫-20。

所述的中藥多糖和中藥皂苷均提取自以下重量份的中藥原料：

桔梗100??半??夏80??黃??芩80??金銀花80??連翹80

麥冬65???山豆根40??甘??草50??赤??芍80??玄參60

白芍80???生地黃45??板藍根90??牡丹皮75??黃連60

由于新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征、禽流感是以肺臟為主的五臟六腑功能失調的烈性急性混合傳染病，所以建立了以歸肺經為主兼五臟六腑為輔的清熱解毒方劑。其中：歸肺經中藥包括桔梗、半夏、黃芩、金銀花、連翹、麥冬和山豆根；歸脾經中藥包括甘草和赤芍；歸腎經中藥包括玄參；歸肝經中藥包括白芍和生地黃；歸心經中藥包括板藍根、牡丹皮和黃連。

所述中藥多糖是本發明免疫佐劑的主要成分，它在水溶液中使免疫原優先水化，起到蛋白保護劑的作用；在動物體內通過每種中藥多糖特有的歸經方式增強免疫原的免疫效果，起到免疫佐劑作用。

所述中藥皂苷是表面活性分子物質，它們都有親水-親脂的雙親功能。中藥皂苷的蛋白保護性和免疫佐劑作用很強；也以特有的歸經方式增強免疫原的免疫效果，起到免疫佐劑作用。

吐溫-20為親水性較強的表面活性物質，親水親脂平衡值(HLB)在15.0以上。它主要作用是平衡佐劑的HLB，保持佐劑具有良好的水溶性。

本發明還提供所述免疫佐劑的制備方法，是將中藥多糖、中藥皂苷以及吐溫-20按照所述比例混合，勻漿即制成本發明所述的雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征、禽流感四聯滅活疫苗佐劑。

其中，中藥多糖和中藥皂苷的提取可以通過現有技術中的多種手段實現，例如可以按照以下方法提取：

中藥多糖的提取：