[發(fā)明專利]一種雞新城疫濃縮凍干卵黃抗體復(fù)合制劑及其制備工藝有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910180912.0 | 申請日： | 2009-10-21 |
| 公開（公告）號： | CN101690813A | 公開（公告）日： | 2010-04-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李尚波;苗玉和;胥桂華;張勇飛;趙冰;武潔梅 | 申請（專利權(quán)）人： | 遼寧益康生物制品有限公司;張勇飛 |
| 主分類號： | A61K39/395 | 分類號： | A61K39/395;A61P31/14;A61P37/04;C08B37/00;C07K16/10;A61K31/715 |
| 代理公司： | 北京萬科園知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11230 | 代理人： | 張亞軍;夏新 |
| 地址： | 111000 遼*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 新城 濃縮 卵黃 抗體 復(fù)合 制劑 及其 制備 工藝 | ||
1.一種雞新城疫濃縮凍干卵黃抗體復(fù)合制劑，其特征在于，它由以下重量份數(shù)的組分組成：
(1)抗雞新城疫病毒卵黃抗體10.0-99.5；
(2)中藥多糖0.5-20.0；
所述的中藥多糖提取自下列重量份的中藥中的一種或兩種以上的組合物：板藍(lán)根10-50、沙參50-100、丹參50-80、茯苓30-50。
2.權(quán)利要求1所述的復(fù)合制劑，其特征在于：進(jìn)一步包含常規(guī)蛋白保護(hù)劑1.0-10.0重量份。
3.權(quán)利要求2所述的復(fù)合制劑，其特征在于：所述的蛋白保護(hù)劑，按重量份計(jì)，是脫脂奶粉1.0-6.0或乳糖1.0-3.0中的一種或兩種的混合物。
4.權(quán)利要求1所述的復(fù)合制劑，其特征在于，所述的抗雞新城疫病毒卵黃抗體是按照以下方法制得的：
(1)按照常規(guī)方法制取抗雞新城疫病毒高免雞蛋；
(2)抗雞新城疫病毒卵黃抗體的提純
(2.1)將步驟(1)得到的抗雞新城疫病毒的高免雞蛋進(jìn)行消毒，打碎雞蛋并分離出卵黃；
(2.2)在(2.1)步分離出的卵黃中加入卵黃重量11倍的無菌去離子水，并調(diào)整pH值至6.00，然后攪拌5分鐘，在4℃的條件下靜置48小時(shí)之后，通過虹吸抽取一次上清；后再將沉淀物用無菌去離子水稀釋8倍，并調(diào)整pH值至6.0，然后攪拌5分鐘，在4℃的條件下靜置24小時(shí)之后，通過虹吸抽取二次上清；合并兩次上清，經(jīng)吸附過濾除去內(nèi)毒素，獲得除毒上清液備用；
(2.3)將(2.2)步得到的除毒上清液除去上清中的卵黃微粒雜質(zhì)；再將濾過液除去低分子雜質(zhì)，并將截留物通過超濾濃縮為稠液，即為抗雞新城疫病毒卵黃抗體。
5.權(quán)利要求1所述的復(fù)合制劑，其特征在于，所述的多糖是按照以下方法提取得到的：
a.將所述的中藥原料切碎、洗凈后，用冷水浸泡2小時(shí)至藥心充分浸透，再加入原料重量12倍的水，加熱至沸騰后在90℃的情況下，通過熱回流濃縮工藝煎煮180分鐘同時(shí)濃縮得到濃縮藥液；
b.將步驟a制備的濃縮藥液通過10000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，棄去沉淀物，獲得上清液并經(jīng)負(fù)壓濃縮，使其形成干物質(zhì)為25％的濃縮藥液；
c.將步驟b得到的濃縮藥液加4-8倍體積量95％的乙醇，靜置過夜，棄去乙醇上清液，沉淀物除去乙醇，然后加水溶解并通過100KD濾膜過濾，除去雜蛋白、內(nèi)毒素大分子雜質(zhì)，收集濾過液再通過1KD納濾膜過濾，除去有機(jī)小分子和無機(jī)分子及離子雜質(zhì)，被截留的物質(zhì)稀釋后逆向水流透析24小時(shí)；取出濃縮液，加5倍體積量99％乙醇沉淀，攪拌，靜置過夜，3000-5000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘；沉淀物除去乙醇并經(jīng)過噴霧干燥，即得到本發(fā)明所使用的中藥多糖。
6.權(quán)利要求1所述的復(fù)合制劑的制備方法，包括以下步驟：
1)按照常規(guī)方法制取抗雞新城疫病病毒高免雞蛋；
2)將步驟1)得到的抗雞新城疫病病毒的高免雞蛋進(jìn)行消毒，打碎雞蛋并分離出卵黃，然后在其中加入卵黃重量11倍的無菌去離子水，并調(diào)整pH值至6.00，然后攪拌5分鐘，在4℃的條件下靜置48小時(shí)之后，通過虹吸抽取一次上清；后再將沉淀物用無菌去離子水稀釋8倍，并調(diào)整pH值至6.0，然后攪拌5分鐘，在4℃的條件下靜置24小時(shí)之后，通過虹吸抽取二次上清；合并兩次上清，經(jīng)吸附過濾除去內(nèi)毒素，獲得除毒上清液，過濾除去上清中的卵黃微粒雜質(zhì)，再將濾過液除去低分子雜質(zhì)，并將截留物通過超濾濃縮為稠液，獲得抗雞新城疫病病毒卵黃抗體；
3)將步驟2)制得的抗雞新城疫病毒卵黃抗體、提取自所述中藥的中藥多糖按照所述的重量份比例混合溶于無菌去離子水中，使每毫升溶液中雞新城疫的卵黃抗體血凝抑制效價(jià)≥1∶2048；
4)將步驟3)得到的溶液分裝于西林瓶進(jìn)行常規(guī)冷凍干燥，并通過Co60照射殺滅微生物，即得到本發(fā)明所述的雞新城疫濃縮凍干卵黃抗體復(fù)合制劑。
7.權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于：步驟2)所述的pH值的調(diào)整使用0.1N?HCl或0.1N?NaOH完成。
8.權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于：步驟2)所述的吸附過濾使用活性炭完成。
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