[發明專利]一種從真菌提取不飽和脂肪酸的方法

無效

• 申請號: 200910180508.3
• 申請日: 2009-10-19
• 公開（公告）號: CN102040502A
• 公開（公告）日: 2011-05-04
• 發明（設計）人: 劉俠
• 申請（專利權）人: 劉俠
• 主分類號: C07C51/42
• 分類號: C07C51/42;C07C51/48;C07C57/03;C07C57/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種從絲狀真菌提取不飽和脂肪酸的方法，屬于化學和生物化學工程脂肪酸提取的領域。

背景技術

不少多不飽和脂肪酸(PUFAs)是人和動物的必需脂肪酸，只能從外界攝入。分類學上的較低等真菌是多不飽和脂肪酸的優良微生物資源，如：二十二碳六烯酸DHA產生菌(Schizochytrium?limacinum，鞭毛菌亞門)、花生四烯酸產生菌(Mortierella?alpina，接合菌亞門)、gama-亞麻酸產生菌(Mucor.sp及Cunninghamella?echinulata，接合菌亞門)。它們具備相當強的合成脂肪酸的能力，有的天然菌種就能合成菌絲體干重30％～40％的脂肪酸，而在他們合成的脂肪酸中，往往都含有PUFAs。因此，近年來受到研究者和企業的熱捧，從絲狀真菌發酵生產(PUFAs)成為醫藥行業、食品行業及飼料添加劑行業的新興行業。

真菌合成的脂肪酸多存在于細胞內，因此脂肪酸的提取必須考慮到如何破碎細胞以充分釋放脂肪酸的問題。另外，脂肪酸中的活性成分PUFAs含有多個活潑的亞甲基，其“戊烯雙鍵”結構易受光、氧、熱、金屬元素(Fe²⁺，Cu²⁺有催化作用)及自由基的影響，發生氧化、酸敗、聚合、雙鍵共軛化等變質反應，從而被破壞而喪失其應有的生理活性，而且還可能形成對人體健康有害的物質。因此，在不飽和脂肪酸的提取時既要保證充分破胞盡量釋放出脂肪酸，又要避免不飽和脂肪酸被氧化而遭到破壞，因此有必要對細胞破碎、脂質提取方法進行優化十分必要。

高溫干燥對裂殖壺菌來說是一種比較好的破胞方法，但因為DHA有多個雙鍵，極易被氧化；壓榨法的損失率也較高；本發明采用酸法對細胞進行破壁，再用有機溶劑進行萃取。既保證了破壁效果，又保護了PUFAs的活性，且適合于規模化生產。

在有機溶劑的選擇上，本發明經過多種溶劑的比較，選擇了容易操作，揮發性又相對較小的己烷以上烷烴。我們把本發明的整體方法稱作酸性有機溶劑法。該方法適合于真菌中二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)，十八碳三烯酸(GLA)、二十碳四烯酸(ARA)等多不飽和脂肪酸的提取，提取物純度和產率高，工藝操作簡單，速度快，并適用于工業化生產。

發明內容

本發明的目標是這樣達到的：將1倍干燥菌體加入10倍(V/W)蒸餾水，混勻后再加入8倍(V/W)濃鹽酸或10當量硫酸，然后于70℃水浴加熱50分鐘至菌體完全消化，冷卻后加入8倍(V/W)正己烷以上烷烴，充分混勻，靜置分層，取上層有機相；用同一溶劑重復洗滌5次，合并有機相，除去溶劑即得本發明所述的含不飽和脂肪酸的提取物。