[發明專利]用于提高對ErbB拮抗劑癌癥治療的有效應答可能性的基因檢測試驗

無效

• 申請號: 200910178622.2
• 申請日: 2001-05-18
• 公開（公告）號: CN101711868A
• 公開（公告）日: 2010-05-26
• 發明（設計）人: 羅伯特·D·馬斯
• 申請（專利權）人: 杰南技術公司
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K39/395;A61P35/00;G01N33/574;A61K31/337
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張紅春

本申請是申請日為2001年05月18日、申請號為01812162.4(國際申請號為PCT/US01/16193)、發明名稱為“用于提高對ErbB拮抗劑癌癥治療的有效應答可能性的基因檢測試驗”的發明申請的分案申請。

本申請要求按照35?U.S.C.119(e)的規定于2000年5月19日提交的臨時申請60/205,754的優先權，該申請已經全文引入本文作參考。

發明領域

本發明涉及對癌癥的治療，所述癌癥的特征在于腫瘤抗原(如ErbB受體，特別是HER2)的過度表達。更具體地，本發明涉及用ErbB拮抗劑，如抗-ErbB抗體，對癌癥易感者或癌癥患者進行更有效地治療，所述患者的腫瘤細胞經過基因擴增試驗確定為過度表達ErbB。本發明還提供了用于此類治療的藥物包。

技術背景

對遺傳和發育的技術和流行病學的進一步認識，使得有可能將遺傳異常與某些惡性疾病以及個體發生特定惡性疾病的危險性的評價聯系起來。然而，絕大多數現有用于評估組織中與個體發生惡性疾病相關或有這種傾向性的方法有著眾所周知的缺點。例如，需要使組織解集的方法，如Southern，Northern，或Western印跡分析，都由于惡性細胞與來自相同組織的正常或非-惡性細胞混合在一起，而精確性降低。此外，組織結構的破壞導致無法將惡性細胞與遺傳異常的存在從形態學特異性的角度來進行聯系。這種情況在已知為異質性的組織類型中尤其是個問題，如人的乳腺癌中，在任一個區域都可能存在大量非-惡性細胞。

her2/neu基因編碼一種蛋白產物，常被稱為p185HER2。天然p185HER2蛋白是一種膜受體-樣的分子，它與表皮生長因子受體(EGFR)具有同源性。對人的乳腺癌中HER2的擴增和過度表達，在某些研究中與較短的無疾病間隔期和較短的總存活率有關(van?de?Vijer等New?Eng.J.Med.317：1239(1988)；Walker等Br.J.Cancer?60：426(1989)；Tandon等J.Clin.Invest.7：1120(1989)；Wright等Cancer?Res.49：2087(1989)；McCann等Cancer?Res51：3296(1991)；Paterson等Cancer?Res.51：556(1991)；and?Winstanleyetal.Br.J.Cancer?63：447(1991))而在其它研究中卻不是這樣(Zhou等Oncogene4：105(1989)；Heintz等Arch?Path?Lab?Med?114：160(1990)；Kury等Eur.J.Cancer?26：946(1990)；Clark等Cancer?Res.51：944(1991)；and?Ravdin等J.Clin.Oncol.12：467-74(1994))。

在早期對103例乳腺癌患者的評估中，那些有三處以上腫瘤細胞陽性腋下淋巴結(結陽性)的患者，比有不到三處陽性淋巴結的患者，更傾向于過度表達HER2蛋白(Slamon等Science?235：177(1987))。在隨后對86例結-陽性乳腺癌患者的評估中，基因擴增、早期復發、以及存活期短之間有顯著相關性。HER2的過度表達可以用Southern和Northern印跡確定，它與通過Western印跡和免疫組化(IHC)評測的HER2癌蛋白的表達相關(Slamon等Science?235：177(1987)；Slamon等Science?244：707(1989))。結果發現，攜帶5個以上拷貝的her2基因的患者比未發生基因擴增的患者，中期存活率縮短近5倍。這種相關性甚至在多變量分析中糾正了結的狀態和其它預后因素之后仍然存在。在另外187例結-陽性患者中也進行了這些研究，結果表明，基因擴增、mRNA的量增加(通過Northern印跡檢測)、以及蛋白的表達增加(通過免疫組化方法檢測)也與存活期的縮短有關(Slamon等Science?244：707(1989))；(也參見美國專利4,968,603)。Nelson等用FISH和免疫組化方法測定了乳腺癌中的過度表達，從而比較了her2/neu基因的擴增(Nelson等Modern?Pathology?9(1)21A(1996))。

組織切片的免疫組化染色是一種可靠的評估異質性組織中蛋白變化的方法。免疫組化(IHC)技術利用抗體來原位探測并觀察細胞的抗原，主要通過顯色反應或熒光方法來進行。該項技術因避免了組織解集的意外后果并允許從形態學角度評估單個細胞而具有優勢。此外，在冰凍過程中，靶蛋白不會被改變。