[發(fā)明專利]一種重組腺病毒的制劑

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910167812.4
• 申請(qǐng)日: 2009-09-29
• 公開（公告）號(hào): CN102028954A
• 公開（公告）日: 2011-04-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊艷艷;郭勇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 成都康弘生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A61K48/00
• 分類號(hào): A61K48/00;A61K47/18;A61K47/10
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種制劑，尤其涉及一種重組腺病毒的制劑。

背景技術(shù)

重組腺病毒作為基因治療領(lǐng)域常用的復(fù)制載體，臨床用藥要求其在保存、運(yùn)輸及使用過(guò)程中保持完整的二十面體病毒殼體結(jié)構(gòu)，維持較高的活病毒數(shù)量和感染復(fù)制能力。然而，腺病毒在高溫、低pH、氧化等條件下極不穩(wěn)定，容易降解。例如，US7202078公開了下述技術(shù)內(nèi)容，當(dāng)重組腺病毒濃度高于1E12vp/ml時(shí)，病毒顆粒通常會(huì)聚集成絲狀，引發(fā)衣殼蛋白裂解，致使感染活性降低。

在實(shí)際的臨床應(yīng)用中，傳統(tǒng)方法主要選擇在-80℃--20℃的低溫條件下保存和運(yùn)輸重組腺病毒藥物，雖然這種方法能夠比較有效地保持腺病毒的結(jié)構(gòu)和活性，但由于需要采用大量的用于保持低溫的材料和設(shè)備，導(dǎo)致這種保存和運(yùn)輸?shù)某杀靖甙海也僮鞔嬖谥T多不便，并存在較大風(fēng)險(xiǎn)。

鑒于這些原因，研究者開始考慮從制劑角度提高用于基因治療的重組腺病毒貯存的穩(wěn)定性，開發(fā)能在2～8℃甚至25℃下較好地保持腺病毒活性的制劑。

例如，US6689600、US7235391、US20080107631A公開了包括Tris緩沖液、甘油、甘露醇、蔗糖、MgCl₂、吐溫-80的重組腺病毒制劑，這些制劑能在2-8℃保存濃度為1E11vp/mL的腺病毒，并維持其6個(gè)月的穩(wěn)定性，但沒有考察該制劑是否可以保存1E12vp/mL及更高濃度腺病毒的穩(wěn)定性。

又如，US7456009和US7351415公開了由Tris緩沖液、非離子表面活性劑吐溫-80、二價(jià)陽(yáng)離子MgCl₂、糖類、NaCl、EDTA或無(wú)水乙醇組成的制劑，該制劑能在2-8℃較好保存1E10vp/rmL腺病毒的活性，也但沒有描述該制劑可以保存1E12vp/mL及更高濃度腺病毒的穩(wěn)定性。

又如，US?2006/0205080A、CN101163794A公開了包含Tris緩沖液、甘氨酸、MgCl₂，及丙二醇、DMSO、PEG、蔗糖、甘油、四氫呋喃乙二醇醚等組成的制劑，該制劑用于保存1E12vp/mL腺病毒，可以較好地保持腺病毒的活性。

可見，這些現(xiàn)有技術(shù)公開的改良制劑通過(guò)優(yōu)化重組腺病毒制劑的組成，在較大程度上，改善了腺病毒的保存濃度和保存溫度。但是，這些改良制劑尚不能用于保存濃度高于2E12vp/ml的腺病毒制劑，且在2-8℃條件下，不能在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)(2年以上)保持制劑中重組腺病毒的活性。而臨床上為了提高療效，需要濃度不低于2E12vp/ml的重組腺病毒制劑。因此，如何進(jìn)一步改良重組腺病毒制劑的組成，來(lái)改善該制劑的穩(wěn)定性及保存濃度、保存溫度和保存時(shí)間，成為一個(gè)亟待解決的技術(shù)問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題之一在于，提供一種能夠在較高溫度下、較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保存高濃度重組腺病毒的藥物組合物。本發(fā)明組合物不僅提高了制劑中重組腺病毒的穩(wěn)定性，尤其是提高了高濃度重組腺病毒制劑的穩(wěn)定性，并延長(zhǎng)了其保存時(shí)間。本發(fā)明目的在于提供一種重組腺病毒制劑，所述制劑含有重組腺病毒、Tris緩沖液、丙二醇和精氨酸。

進(jìn)一步，所述Tris緩沖液的濃度為1mM-100mM，優(yōu)選為5mM-50mM，更優(yōu)選為10mM。

進(jìn)一步，所述丙二醇的濃度為5W/V％-20W/V％，優(yōu)選為10W/V％-15W/V％。

進(jìn)一步，所述精氨酸的濃度為50mM-250mM，優(yōu)選為100mM-200mM，更優(yōu)選為150mM。

進(jìn)一步，所述制劑中還含有抗氧化劑。其中，優(yōu)選所述的抗氧化劑選自亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、谷胱甘肽、硫代水楊酸、半胱氨酸鹽酸鹽、二硫代甘醇酸、硫脲、硫代山梨醇或硫代葡萄糖的任一種或其組合，更優(yōu)選為谷胱甘肽。

進(jìn)一步，所述谷胱甘肽的濃度為5mM-100mM，優(yōu)選為10mM-50mM，更優(yōu)選為20mM。

進(jìn)一步，所述制劑中還含有抗氧增效劑。其中，優(yōu)選所述的抗氧增效劑為枸櫞酸鈉、琥珀酸鈉或次磷酸鈉的任一種或其組合，更優(yōu)選為枸櫞酸鈉。

進(jìn)一步，所述枸櫞酸鈉的濃度為5mM-100mM，優(yōu)選為10mM-50mM，更優(yōu)選為30mM。

進(jìn)一步，本發(fā)明的制劑由重組腺病毒、10mM的Tris，10W/V％丙二醇和100mM的精氨酸組成，用HCl調(diào)節(jié)pH7.4-8.6。

進(jìn)一步，本發(fā)明的制劑由重組腺病毒、10mM的Tris，10W/V％丙二醇、100mM的精氨酸、20mM的谷胱甘肽組成，用HCl調(diào)節(jié)pH7.4-8.6。