[發明專利]大規模生產辣椒核雄性不育植株的方法

無效

• 申請號: 200910163215.4
• 申請日: 2009-12-23
• 公開（公告）號: CN101731146A
• 公開（公告）日: 2010-06-16
• 發明（設計）人: 文錦芬
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責任公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

技術領域

本發明主要涉及一種利用植物組織培養技術大規模生產辣椒核雄性不育兩用系不育株的方法，特別涉及一種提高再生植株數量的方法。

背景技術

辣椒是一種十分重要的茄果類蔬菜，它不僅被大量用作調味品，還被開發用于健康食品和藥物。辣椒雜交優勢十分明顯，用核雄性不育兩用系做母本生產雜交一代種子是辣椒雜交優勢利用的主要手段，用辣椒核雄性不育兩用系做母本進行雜交辣椒的生產，播種的辣椒核雄性不育兩用系中有50％的可育株，需要在花期拔除所有的可育株，有時因為拔除可育株不完全，容易造成雜交種子的純度低。

到目前為止，用于制種的辣椒核雄性不育兩用系的不育株主要還是通過在花期將核雄性不育兩用系中的50％的可育株拔除而獲得，需要花費大量的人力；另外獲得用于制種的辣椒核雄性不育兩用系的不育株也有通過葉片等進行組織培養獲得再生植株，但辣椒通過葉片等進行組織培養獲得再生植株難度十分大，且變異比較嚴重，不具備實用性；還有一種獲得用于制種的辣椒核雄性不育兩用系不育株的方法是通過扦插繁殖的方式，但扦插繁殖的繁殖系數小，多代繁殖還有退化的現象。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，利用植物組織培養技術，提供一種大規模生產辣椒核雄性不育植株的方法。

本發明通過下列技術方案完成：一種大規模生產辣椒核雄性不育植株的方法，它包括下述步驟：

A、由辣椒核雄性不育兩用系不育株帶腋芽的莖段，接種在腋芽誘導培養基上，在人工控制的環境條件下，誘導腋芽的萌發伸長，形成叢生苗；

B、由叢生苗分割成帶腋芽的莖段，接種在腋芽誘導培養基上，在人工控制的環境條件下，誘導腋芽的萌發伸長，形成次級叢生苗；

C、在相同的條件下，通過重復的繼代培養擴增叢生苗；

D、分割叢生苗，接種到不定根誘導培養基上，在人工控制的環境條件下，誘導不定根的形成；

E、選取生根多且健壯的植株去掉封口膜煉苗7~10d，然后洗凈根系上的培養基，移入含有珍珠巖和草炭土混合基質的營養缽并置于溫室中，用塑料薄膜覆蓋，5d后逐步揭去薄膜通風，增加光照，及時補足營養缽水分，15~20d后將營養缽移至露地，10~15d后將幼苗移到大田中。

本發明所說的叢生苗是在一個苗擴增培養基上通過重復繼代培養大規模擴增生產的。

所說A、B、C步驟中的腋芽萌發生長至具有4個以上節的叢生苗，叢生苗切割成具有單個節的莖段，將各個莖段移入腋芽誘導培養基，并在該培養基上進行腋芽誘導培養，通過重復的莖段切割誘導培養來擴增叢生苗，將形成的叢生苗切割成單株，將各個單株移入不定根誘導培養基，并在此培養基上進行不定根的誘導，形成完整的再生植株。

所述的E步驟的混合基質中珍珠巖與草炭土體積比為：1∶1~2∶1。

所說的腋芽誘導培養基為：MS基礎培養基，并在該培養基中添加質量比為3％的蔗糖、0.6％的瓊脂，0.5~2.0％的芐基腺嘌呤，和0.01~0.1％的a-萘乙酸，控制培養基pH?5.8，在121℃下滅菌20min。

所說的叢生芽不定根誘導培養基為：1/2MS基礎培養基，其中亞鐵鹽的含量與MS培養基相同，在1/2MS基礎培養基中還含有質量比為3％的蔗糖，0.6％的瓊脂，0.02~0.1％的a-萘乙酸，和0.02~0.1％的吲哚丁酸，控制培養基pH?5.8，于121℃下滅菌20min。

所說的人工控制的環境條件為：每天連續光照12~14h，溫度24~26℃，光照強度40~50umol.m^-2.s^-1。

和現有技術相比，本發明有如下優點或積極效果。

1、利用腋芽再生植株，接種材料不需要經過脫分化和再分化的過程，產生的再生植株性狀穩定、一致。

2、所接種的材料已經有帶有腋芽，在培養時只需腋芽的萌發，技術難度較小。

3、通過將再生植株分割成帶腋芽的莖段進行擴繁，繁殖系數大，每年能夠產生大量的再生植株。

4、所獲得的植株都為雄性不育株，栽入大田后不需篩選可育株的過程，可以直接用于雜交制種。

具體實施方式

下面通過實施例對本發明作進一步說明。

實施例1

辣椒核雄性不育兩用系2003A大田植株的大規模組織培養，其步驟是：

1.將市購的辣椒核雄性不育兩用系2003A種植于露地農田中；