[發(fā)明專利]棘孢木霉及在合成(R)-[3,5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910155775.5
• 申請日: 2009-12-25
• 公開（公告）號: CN101724568A
• 公開（公告）日: 2010-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王普;何軍邀;唐俊
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/22;C12R1/885
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物催化技術(shù)領(lǐng)域，涉及一株新的菌種——棘孢木霉(Trichoderma?asperellum)ZJPH0810，及其在微生物催化不對稱合成(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇中的應(yīng)用。

(二)背景技術(shù)

含芳香基的手性醇是多種手性藥物合成的關(guān)鍵手性中間體。阿瑞吡坦(Aprepitant)，商品名：Emend，化學(xué)名稱：5-[[(2R，3S)-2-[(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-嗎啉基-]甲基]-1，2-二氫-3H-1，2，4-三氮唑-3-酮基。2003年美國食品和藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)阿瑞吡坦用于高度致吐化療方案所致惡心、嘔吐的藥物，它是一個全新機制的鎮(zhèn)吐藥物-NK-1受體拮抗劑。NK-1受體拮抗劑對各種致吐刺激具有廣泛的鎮(zhèn)吐作用，且在遲發(fā)性嘔吐中作用突出。阿瑞吡坦是目前唯一應(yīng)用于臨床的NK-1受體拮抗劑。此外，阿瑞吡坦還具有治療抑郁及其他精神疾病的作用。阿瑞吡坦與5-HT₃受體拮抗劑、地塞米松合用被列為高致吐化療和延遲性嘔吐的標(biāo)準(zhǔn)藥物治療方案。目前，阿瑞吡坦被認為是效果最好的化療后止吐藥之一。(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇是阿瑞吡坦合成的關(guān)鍵手性中間體，獲得對映體純的1-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇是合成阿瑞吡坦的關(guān)鍵步驟之一。

采用傳統(tǒng)的化學(xué)法制備(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇，需要使用價格昂貴的金屬催化劑，如銠、釕等，而且會對環(huán)境造成污染。利用生物法制備(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇具有反應(yīng)條件溫和、立體選擇性高、環(huán)境友好等優(yōu)點。

目前，文獻報道的生物法催化合成(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇主要有以下幾種：

法國羅地亞有限公司的Gelo-Puji等(Microbial?and?homogenousasymmetric?catalysis?in?the?reduction?of?1-[3，5-bis(trifluoromethyl)phenyl]ethanone[J].Tetrahedron：Asymmetry，2006，17：2000-2005)報道了采用開菲爾乳桿菌(Lactobacillus?kefir)和黑曲霉(Aspergillusniger)可還原[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙酮得到(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇，其中以開菲爾乳桿菌(Lactobacillus?kefir)轉(zhuǎn)化[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙酮時，底物初始濃度為5mmol/L，反應(yīng)16小時的產(chǎn)率為100％，ee值大于99％；當(dāng)?shù)孜餄舛忍岣叩?0mmol/L，反應(yīng)16小時后產(chǎn)率僅為13％；底物濃度增至200mmol/L時，反應(yīng)16小時的產(chǎn)率為2％，延長反應(yīng)時間到96小時后，產(chǎn)率為31％。因該菌種只在底物濃度偏低時才能獲得較高的產(chǎn)率，不適合工業(yè)化應(yīng)用。

印度Vankawala?等(Efficient?Synthesis?of(1R)-[3，5-Bis(trifluoromethyl)phenyl]Ethanol，a?Key?Intermediate?forAprepitant，an?NK-1?Receptor?Antagonist[J].Synthetic?Communications，2007，37：3439-3446)報道了以外消旋的[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇為底物，乙烯醋酸酯作為酰基受體，通過南極假絲酵母脂肪酶(Candidaantarctica?lipase-B，CAL-B)催化(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇生成(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙酸乙酯，而外消旋體中的S-型醇不發(fā)生反應(yīng)，繼而再用鹽酸水解(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙酸乙酯可得到(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇，產(chǎn)率為84％，ee值大于99％，反應(yīng)式如下：

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一株新的菌種——棘孢木霉(Trichodermaasperellum)ZJPH0810，及其在微生物催化不對稱合成(R)-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]乙醇中的應(yīng)用。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

棘孢木霉(Trichoderma?asperellum)ZJPH0810，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，地址：中國武漢武漢大學(xué)，430072，保藏日期：2009年12月16日，保藏編號：CCTCC?NO：M?209307。