[發明專利]一種葫蘆素B的提取分離方法

有效

• 申請號: 200910154837.0
• 申請日: 2009-11-24
• 公開（公告）號: CN101759746A
• 公開（公告）日: 2010-06-30
• 發明（設計）人: 單偉光;唐嵐;單海峰;占扎君
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

技術領域

本發明涉及天然產物有效成分的提取與分離，具體涉及一種葫蘆素B的提取分離方法。?

背景技術

葫蘆素B是一種分布在多種植物中的葫蘆烷類物質，人們在甜瓜、葫蘆、白泄根等植物中均有發現葫蘆素B的分布。但是傳統的葫蘆素B提取技術主要有：乙醇熱提取法、超聲乙醇提取法等，在這些提取分離方法與技術中，其基于的技術原理均是針對具有生物活性的目標化合物的理化性質而采取相應的分離方法與技術，整個過程中為一種物理過程，并未考慮天然產物的所有化學成分的綜合利用，因而資源利用率低、產品得率低且由于相似組分多而使分離難度大。?

結構轉化提取法是指在提取過程中，先采用一些基于化學、生物反應技術(如水解、酶解、微生物轉化等)，將與目標化合物結構類似的化合物轉化成目標物，再進行相關的提取分離，從而提高目標化合物的提取得率的一種方法。該方法應用于天然產物微量、高值成分的提取中，不僅可以使原料得到充分的利用，提高得率，同時也會使有效成分的分離純化難度大為降低，從而能降低生產成本，提高產品市場競爭力。?

隨著科學技術發展，目前絕大部分天然產物中的主要化學成分已闡明，這使得結構轉化法應用于天然產物有效成分的提取分離成為可能。目前，利用結構轉化法應用于天然產物的合成和對先導化合物結構修飾的研究較多，但在天然產物有效成分的提取分離方面的報道卻較少，而將其作為一種提取的方法或技術概念運用到提取分離中，目前還尚未見報道。?

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種葫蘆素B的提取分離方法，通過將結構轉化法方法運用到提取中以提高葫蘆素B的提取率，該工藝過程簡單，操作簡便，有效成分的提取率高。?

為解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案：?

一種葫蘆素B的提取分離方法，包括如下步驟：?

1)將原料甜瓜蒂粉碎，用乙醇滲漉乙醇回流提取，提取液濃縮以后，用乙酸乙酯萃取三次以上，回收乙酸乙酯，即得總葫蘆素提取物；?

2)取總葫蘆素提取物溶于體積分數25～45％的乙醇水溶液中，在醋酸存在下進行水解反應，充分反應后調節pH值至中性，濃縮至干；所述醋酸的濃度為0.1～0.3mol/L；?

3)步驟2)所得濃縮物經純化處理得到葫蘆素B含量在60％以上的葫蘆素B產品。?

進一步，本發明所述的純化處理推薦采用如下方法：所得濃縮物用體積分數25～45％的乙醇水溶液溶解，再通過大孔樹脂柱層析，以體積分數50～60％的乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮得到葫蘆素B含量在60％以上的葫蘆素B產品。本方法純化制得的葫蘆素B產品，其中葫蘆素B的質量含量在60％以上，符合中藥部頒標準藥品質量標準的規定。所述的大孔樹脂優選XAD-16。?

本發明步驟2)中采用酸性水解，其目的是將其中的葫蘆素B葡萄糖苷轉化為葫蘆素B，以增加葫蘆素B的量。所述的酸性水解在體積分數25～45％的乙醇水溶液中進行，當乙醇水溶液的體積分數低于25％時，不利于總葫蘆素提取物的溶解；當乙醇水溶液的體積分數高于45％時，則會影響水解效率。最優選酸性水解在體積分數30％的乙醇水溶液中進行。?

步驟2)所述的水解反應推薦在70～90℃進行2～5小時，優選在70～80℃進行2小時。?

步驟2)所述的水解反應體系中，優選醋酸濃度為0.1～0.2mol/L，最優選0.1mol/L。?

步驟2)水解反應中所述的體積分數25～45％的乙醇水溶液的體積用量以總葫蘆素提取物的質量計推薦為50～100ml/g。?

本發明步驟1)中，滲漉或回流提取使用的乙醇，優選體積分數為95％的乙醇。萃取劑乙酸乙酯的體積推薦為濃縮后的提取物體積的3～4倍。?

本發明具體推進所述的方法按照如下進行：?

1)將原料甜瓜蒂粉碎，用體積分數95％的乙醇滲漉或者體積分數95％的乙醇回流提取，提取液濃縮以后，用體積為濃縮后的提取物體積3～4倍的乙酸乙酯萃取三次，回收乙酸乙酯，再濃縮，即得總葫蘆素提取物；?

2)取總葫蘆素提取物溶于體積分數25～45％的乙醇水溶液中，所述體積分數25～45％的乙醇水溶液的體積用量以總葫蘆素提取物的質量計推薦為50～100ml/g，在0.1～0.2mol/L醋酸存在下于70～80℃進行水解反應2小時，然后調節pH值至中性，濃縮至干；?