[發明專利]微波結合酶法破酵母細胞壁無效
| 申請號： | 200910154634.1 | 申請日： | 2009-11-23 |
| 公開（公告）號： | CN102071150A | 公開（公告）日： | 2011-05-25 |
| 發明（設計）人： | 吳菁;史利斌 | 申請（專利權）人： | 湖州來色生物基因工程有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/16 | 分類號： | C12N1/16;C12N1/18;C12N1/06;C12R1/865 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 313100 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 微波 結合 酶法破 酵母 細胞壁 | ||
1.微波結合酶法破酵母細胞壁，其特征包括以下幾個步驟：
(1)酵母菌培養
將斜面培養基上的酵母菌接種到裝有300ml液體培養基的錐形瓶中，置于30℃、180r.min-1轉速的恒溫震蕩培養箱中培養20h。
將培養液分成5份接種到新的無菌培養液中，置于30℃、180r.min-1轉速的恒溫震蕩培養箱中培養30h。
(2)復合酶破壁
取一份培養液加入1.8g蝸牛菌，用HCl調節PH至5.0，控制溫度45℃，180r.min-1轉速下破壁6h。
(3)微波加熱破壁
將培養液離心(3600n/min)10min，得到酵母沉淀，置于冷凍箱中冷凍20min。將凍結的酵母沉淀放入頻率2450MHZ、輸出功率750W的微波爐中處理30S。此時酵母由固體逐漸變成為液體。
2.如權利(1)所訴酵母菌的培養，其特征在于所用的培養基為液體種子培養基[3％葡萄糖+1％玉米漿+0.2無機營養鹽(營養鹽的加量按C＝8∶1或50ml/l)]。營養鹽的組成：(NH4)2SO4?14g/l，KH2PO4?20g/l，CaCl2.2H2O?4g/l，MgSO41.5g/l。
3.如權利(2)所訴復合酶破壁，其特征在于所用的復合酶是蝸牛酶，蝸牛酶是一種混合酶，其中包括纖維素酶、蛋白水解酶和果膠酶等，有三、四十種之多。
4.如權利(2)所訴復合酶破壁，其特征在于最經濟的破壁條件為蝸牛酶的加入量為6mg/ml，溫度控制45℃時。
5.如權利(3)所訴微波加熱破壁，其特征在于微波加熱的最大收益條件為2450MHZ的頻率、功率為750W反應30S左右。
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