[發明專利]一種多粘類芽孢桿菌及其應用

無效

• 申請號: 200910153984.6
• 申請日: 2009-11-30
• 公開（公告）號: CN101712941A
• 公開（公告）日: 2010-05-26
• 發明（設計）人: 李斌;蘇婷;余山紅;劉寶平;謝關林
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/04;C07K14/195;A01N63/00;A01P1/00;C12R1/01
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發明涉及一種類芽孢桿菌，尤其涉及一種多粘類芽孢桿菌 (Paenibacillus?macerans)及其應用。

背景技術

作物細菌性青枯病是由茄科勞爾氏菌(Ralstonia?solanacearum)(俗稱 青枯菌)引起的一種系統侵染的毀滅性土傳病害，俗稱“植物瘟病”。發病 作物莖葉萎蔫下垂至全株枯死，一般田塊的發病率為10％-15％，重病田 的發病率高達80％-99％，導致作物產量的嚴重下降，甚至絕收。病原的 寄主范圍廣泛，可侵染44個科的數百種植物，包括蕃茄、茄子、煙草、 花生、馬鈴薯、香蕉等。

雖然不同植物在不同環境條件下的癥狀和危害程度表現若干差異，但 共同特點是細菌從植株根部侵入，通過增殖和一系列生化活動損壞寄主維 管束輸導組織，導致植株失水枯萎，死亡。迄今為止，通過采用抗青枯的 作物品種去防治青枯病的做法是很少的，因為已出現的品種不僅抗性低而 且抗性容易喪失，其他的農業防治手段因受地域條件的限制，也難以大面 積推廣。化學防治上，雖然有農用鏈霉素、銅制劑等藥物的出現，但均不 是針對青枯病的防治農藥，而且防效差，不穩定，病原菌極易產生抗藥性， 因此市場上尚無防治植物青枯病的有效藥劑。

目前世界上普遍認為生物防治是解決土傳病害最有希望的途徑之 一。所以，本領域技術人員迫切需要能夠有效防治植物青枯病的新的微生 物制劑和方法的出現。

發明內容

本發明提供了一種防治植物青枯病的多粘類芽孢桿菌，該菌株可在離 體條件下對青枯菌不同生化型菌株的生長產生抑制作用。

一種防治植物青枯病的多粘類芽孢桿菌菌株，經鑒定命名為多粘類芽 胞桿菌(Paenibacillus?polymyxa)ZJU0901，保藏于位于武漢市珞珈山武 漢大學的中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，保藏日期為2009年7月 19日，保藏號為CCTCC?NO：M?209157。

其主要形態及生物學特征如下：細胞呈桿狀，革蘭氏染色陽性，以周 生鞭毛運動。在膨大胞囊內有橢圓形芽孢，在營養瓊脂上無可溶性色素。 兼性厭氧。在培養基上的菌落薄，呈星狀擴展，菌量多而粘，表面無光澤。 生長物會粘連到培養基上。生長最適溫度28-30℃，生長溫度范圍為 15-50℃。生長最適pH為7.0，生長pH范圍為5.6-8.5。

本發明還提供了一種含有上述多粘類芽胞桿菌ZJU0901的菌懸液，制 備該菌懸液可以選用任意細菌培養基，優選采用NB培養基，其有效菌(多 粘類芽胞桿菌ZJU0901)含量優選為10⁷～10⁸CFU/ml，可以直接應用于防 治植物青枯病。

本發明提供了一種無菌濾液，通過如下方法制備：

取含多粘類芽胞桿菌ZJU0901的菌懸液，離心后取上清液，上清液經 微孔濾膜過濾即為無菌濾液。

本發明提供了一種抗菌蛋白粗提液，通過如下方法制備：

取含多粘類芽胞桿菌ZJU0901的菌懸液，離心后取上清液，上清液經 微孔濾膜過濾得到無菌濾液，將乙醇加入無菌濾液中進行沉淀，將沉淀溶 于緩沖溶液中即得抗菌蛋白粗提液。

優選地，所述無水乙醇與菌懸液體積比為1∶1，具有最大的抑菌活性。

優選地，所述緩沖溶液優選為Tris緩沖液，當然也可以選擇其它緩沖 溶液，只要不會使抗菌蛋白變性即可，pH在6.0～8.0之間。

本發明還提供了多粘類芽胞桿菌ZJU0901在防治植物青枯病中的應 用。

優選地，所述的植物為蕃茄、茄子、煙草、花生、馬鈴薯或香蕉。因 為這些植物的青枯病大多由茄科勞爾氏菌(Ralstonia?solanacearum)引起 的。所述的植物最好是番茄。

本發明菌株可在離體條件下對青枯菌不同生化型菌株的生長產生抑 制作用，可有效防治植物青枯病。

附圖說明

圖1為本發明菌株不同處理下番茄青枯病的病害發生情況；

圖2為本發明菌株不同處理下番茄青枯病的病情嚴重度；

圖3為本發明菌株不同處理下土壤中青枯病菌含量的變化情況。

具體實施方式