[發明專利]梅毒螺旋體抗體唾液快速檢測試紙條

無效

• 申請號: 200910152613.6
• 申請日: 2009-09-10
• 公開（公告）號: CN101661040A
• 公開（公告）日: 2010-03-03
• 發明（設計）人: 鄭隆泗;李洪江
• 申請（專利權）人: 杭州艾力康醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/571
• 分類號: G01N33/571;G01N33/558;G01N33/532;G01N33/52
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，尤其涉及一種梅毒螺旋體抗體唾液快速檢測試紙條。

背景技術

梅毒是由蒼白(梅毒)螺旋體引起的慢性、系統性性傳播疾病(VD，STD)。絕大多數是通過性途徑傳播，臨床上可表現為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潛伏梅毒。它是<中華人民共和國傳染病防治法>中列為乙類防治管理的病種。

梅毒螺旋體(Tre-ponema?palidum)1905年由法國科學家Schaudinn與Hoffmanu發現并報告的。因其透明不易著色，又稱之為蒼白螺旋體。梅毒螺旋體是厭氧菌，在體內可長期生存繁殖，只要條件適宜，便以橫斷裂方式一分為二的進行繁殖。梅毒通過性行為可以在人群中相互傳播，并可以由母親傳染給胎兒，危及下一代。極少數患者通過接吻、哺乳、接觸病人的日常用品而傳染。在性傳播疾病中，梅毒的患病人數是低的，但由于其病程長，危害性大，因此得到人們的重視。

梅毒在全世界流行，據WHO估計，全球每年約有1200萬新發病例，主要集中在南亞、東南亞和次撒哈拉非洲。梅毒于1505年經印度傳入我國廣東，至今已近500年。解放前是中國四大性病之首，60年代初基本被消滅，80年代再次發生和流行。1991年報告病例數為1870例，1995年11336例，1997年33668例。1997年以來占報告8種性病的比例在6％以上，呈明顯增多趨勢，臨床經常可見一、二期梅毒，也已發現三期梅毒和先天梅毒。

目前，檢測梅毒最常用的方法是免疫檢測，此方法以抗原-抗體的特異性識別為基礎，包括傳統的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和近來興起的膠體金法兩種。膠體金法分為免疫層析和免疫滲濾兩種方式，其中以免疫層析法最為方便、快捷。

免疫層析膠體金技術是新型的診斷技術，已得到較為廣泛的應用，基本原理如下：利用膠體金標記一種抗原或抗體，在試紙條的硝酸纖維素膜上包被相應的配對抗原或抗體，檢測時當樣品中含有相應的特異性抗體或抗原時，膠體金標記顆粒和樣品中配體相結合形成復合物，然后在硝酸纖維素膜上層析，再被包被的抗原或抗體捕獲，形成肉眼可見的檢測線(T線)，通過檢測線的有無實現對結果的判定。但現有的試紙條大多以血液為樣品，不適合現場檢測和自檢，檢測成本較高。

發明內容

本發明提供了一種梅毒螺旋體抗體唾液快速檢測試紙條，該試紙條可以用唾液作為樣品，解決了現有試紙條不適合現場檢測，檢測成本較高的問題。

一種梅毒螺旋體抗體唾液快速檢測試紙條，包括底板，底板上依次粘貼有樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜以及吸樣墊，所述的膠體金墊上附著有膠體金標記的可與梅毒螺旋體抗體特異性結合的鼠抗人IgG抗體，所述的硝酸纖維素膜上包被有由梅毒螺旋體抗原構成的檢測線以及由可與鼠抗人IgG抗體特異性結合的羊抗鼠二抗抗體構成的質控線。

所述的梅毒螺旋體抗體是醫學上檢測人體是否感染梅毒螺旋體的標記物，該標記物大量存在于人體血液中，在唾液中也有少量存在。所述的梅毒螺旋體抗原是指人重組梅毒螺旋體抗原，可與梅毒螺旋體抗體特異性結合。人重組梅毒螺旋體抗原、鼠抗人IgG抗體以及羊抗鼠二抗抗體均是市售產品，也可以通過現有方法制備獲得。

所述的膠體金墊上附著有0.14～0.23μg/cm²所述的鼠抗人IgG抗體，在該范圍內的抗體量滿足試紙條以唾液為樣品進行檢測的靈敏度要求。

所述的膠體金墊制備方法如下：

取膠體直徑為15～35nm的膠體金溶液，調節pH值至8.0～8.2，以每100ml膠體金溶液計，加入0.55～1.0mg的可與梅毒螺旋體抗體特異性結合的鼠抗人IgG抗體，攪拌后用牛血清蛋白封閉，離心去上清液，加入相同體積的膠體金溶液復溶，將每毫升溶液均勻鋪在40cm²玻璃纖維膜上，干燥后制得膠體金墊。

所述的檢測線中梅毒螺旋體抗原的含量為0.04～1.0μg/cm；所述的質控線中可與所述的羊抗鼠二抗抗體含量為0.04～1.0μg/cm。在該范圍內的抗體量滿足試紙條以唾液為樣品進行檢測的靈敏度要求。

所述的檢測線包被方法如下：

將所述的梅毒螺旋體抗原溶解在磷酸緩沖溶液中制得濃度為0.04～1.0mg/ml溶液，利用該溶液以1～1.5μl/cm的用量在硝酸纖維素膜的一端劃線，干燥后即得檢測線。

所述的質控線包被方法如下：