[發明專利]微生物溶菌酶在預防豬疾病的藥物及添加劑中的應用方法

無效

• 申請號: 200910147776.5
• 申請日: 2009-06-19
• 公開（公告）號: CN101612393A
• 公開（公告）日: 2009-12-30
• 發明（設計）人: 潘宏濤
• 申請（專利權）人: 杭州康源飼料科技有限公司
• 主分類號: A61K38/48
• 分類號: A61K38/48;A61P1/00;A61P31/04;A61P37/04;A23K1/165;A61K31/165
• 代理公司: 北京市盛峰律師事務所
• 代理人: 李賀香

技術領域

本發明涉及畜牧行業，尤其涉及一種微生物溶菌酶在預防豬疾病的藥物及添加劑中的應用方法。

背景技術

仔豬腹瀉是養豬生產中的一種典型的多因素疾病，據統計，仔豬腹瀉的發病率為35％，其間接損失又表現在治愈仔豬生長發育遲緩，飼料轉化率低，嚴重威脅養豬業的發展。自2006年5月以來，在全國各地先后爆發流行豬高熱病，引起大批豬只發病死亡，造成重大的經濟損失。直至目前，高熱病仍在全國22個省份的豬群中發生流行，危害豬只的健康生長，威脅著養豬業的發展。抗生素在養殖中的使用所帶來的不良后果大家都已充分認識。許多專家都認為在全國很多地區廣泛流行的“豬高熱病”的一個重要原因是豬的免疫力低下，抗病力低，而長期地、大劑量地使用抗生素是導致豬免疫力低下的一個重要原因。

發明內容

本發明的目的在于提供一種微生物溶菌酶在預防豬疾病的藥物及添加劑中的應用方法，利用該方法得到的藥物和添加劑能有效抗菌，治療仔豬的細菌性疾病、促生長、可應用、提高豬免疫力，而且無殘留、無污染。

為了實現上述目的本發明采用的技術方案如下：

本發明微生物溶菌酶在預防豬疾病的藥物及添加劑中的應用方法，在藥物和添加劑中加入溶菌酶，并且保證濃度在300ppm。

本發明的另一個技術方案如下：

本發明微生物溶菌酶在預防豬疾病的藥物及添加劑中的應用方法，在藥物和添加劑中加入溶菌酶，并且保證仔豬每天采食溶菌酶1-2g。

本發明的再一個技術方案如下：

本發明微生物溶菌酶在預防豬疾病的藥物及添加劑中的應用方法，在藥物和添加劑中加入溶菌酶，保證濃度在300ppm，同時添加氟本尼考，溶菌酶配比氟本尼考的比例為2∶1～1∶1。

本發明的有益效果如下：

本發明有效治療豬的細菌性疾病及高熱病，緩解癥狀，顯著提高豬的免疫力，減緩應激反應，改善維護胃腸道菌群平衡。療效好、安全性高，成本低廉，無耐藥性、無藥物殘留、無毒副作用、是綠色環保的活性物質。

具體實施方式

溶菌酶是能溶解細菌細胞壁的一種酶，是一類物質的的總稱。作為非特異性免疫的重要成員，溶菌酶在防御外源微生物入侵方面發揮重要的作用，其在動物的免疫細胞和巨噬細胞中含量比較高。溶菌酶對革蘭氏陽性菌、好氣性孢子形成的菌、枯草桿菌、耐輻射微球菌均具有良好的分解作用，對大腸桿菌、普通變球菌和副血性弧菌等革蘭氏陰性菌也具有溶解作用。基于此，本發明將溶菌酶添加到用于預防豬疾病的藥物和添加劑中，來預防豬的細菌性疾病。

本專利所用的溶菌酶的要求為：通過藥敏試驗，在100ppm時應有明顯的抑菌圈，即抑菌圈的直徑＞10mm。藥敏試驗方法如下：

做不同細菌的藥敏試驗可選擇不同的培養基，如做大腸桿菌的藥敏試驗可選擇普通營養瓊脂或麥糠凱培養基。做沙門氏菌可選擇血清培養基。

一、一般LB培養基的配制

1、液體培養基的配制

蛋白胨1g、NaCl?1g、酵母提取物0.5g(建議選用國外公司產品)溶于100ml水中。

2、固體培養基的配制

在液體培養基的基礎上每100ml中添加瓊脂1.7g或瓊脂粉2g。

二、滅菌

整個實驗過程中所用的培養基、平板、槍頭、棉簽、生理鹽水以及緩沖溶液均需要滅菌。

三、操作過程

1、將指示菌(大腸桿菌、沙門氏菌等等)從培養液(基)中接種于平板活化培養，待菌落長出后在平板上挑選典型菌落接種于試管中的液體培養基中培養4-6小時后比濁。

2、用涂菌棒(或者滅菌棉簽)將待檢細菌混懸液涂抹于平皿培養基表面，要求涂布均勻致密。

3、以無菌操作將滅菌的不銹鋼小管(也可用玻璃管、瓷管)，放置在培養基上打孔，將孔中的培養基用針頭挑出，并以火焰封底，使培養基能充分的與平皿融合(以防藥液滲漏，影響結果)。

4、將配制好的待測樣品液80微升加入樣孔中，樣品加完后放入30-37℃的培養箱中培養12-18小時后觀察結果。

注意：試驗的過程在無菌的條件下操作。

四、溶菌酶樣品液的配制

1、粉狀樣品的配制：

取溶菌酶樣品用滅菌好的生理鹽水逐級稀釋到濃度梯度為300ppm，200ppm，100ppm，50ppm然后分別取80微升稀釋好的溶液置于樣品孔中。(注：在溫度較低的情況下，可能會出現稍微的不溶的情況，可加熱至35-40℃即可溶解)

2、注意事項