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[發(fā)明專利]通過導入NOTCH基因?qū)⒐撬杌|(zhì)細胞誘導分化為神經(jīng)細胞或骨骼肌細胞的方法有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 200910147488.X 申請日: 2003-02-06
公開(公告)號: CN101584869A 公開(公告)日: 2009-11-25
發(fā)明(設(shè)計)人: 出澤真理;澤田元;菅野洋;高野雅彥 申請(專利權(quán))人: 桑比歐公司
主分類號: A61K48/00 分類號: A61K48/00;A61K35/30;A61K35/34;A61P25/16;A61P25/28;A61P21/00;C12N5/10
代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務(wù)所 代理人: 羅菊華
地址: 美國加*** 國省代碼: 美國;US
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 通過 導入 notch 基因 骨髓 基質(zhì) 細胞 誘導 化為 神經(jīng)細胞 骨骼肌 方法
【權(quán)利要求書】:

1.治療有效量的神經(jīng)前體細胞在制備用于治療患有脊髓損傷、腦 血管損傷、青光眼或神經(jīng)退化癥的患者的藥物組合物中的用途;

其中所述神經(jīng)前體細胞通過包括以下步驟的方法體外產(chǎn)生:

(1)從骨髓分離骨髓基質(zhì)細胞,和在添加了血清的標準基本培養(yǎng) 基中培養(yǎng)所述細胞;和

(2)將編碼由Notch細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成的蛋白的核酸導入所述細 胞,和進一步培養(yǎng)所述細胞以生成所述神經(jīng)前體細胞。

2.治療有效量的神經(jīng)細胞在制備用于治療患有脊髓損傷、腦血管 損傷、青光眼或神經(jīng)退化癥的患者的藥物組合物中的用途;

其中所述神經(jīng)細胞通過包括以下步驟的方法體外產(chǎn)生:

(1)從骨髓分離骨髓基質(zhì)細胞,和在添加了血清的標準基本培養(yǎng) 基中培養(yǎng)所述細胞;

(2)將編碼由Notch細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成的蛋白的核酸導入所述細 胞,和進一步培養(yǎng)所述細胞;和

(3)在所述培養(yǎng)基中加入環(huán)腺苷酸增多劑和/或第一細胞分化刺 激因子,和進一步培養(yǎng)所述細胞以生成所述神經(jīng)細胞,其中所述第一 細胞分化刺激因子選自堿性成纖維細胞生長因子,睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 及其混合物,其中所得分化細胞是導入了所述核酸的骨髓基質(zhì)細胞的 子代。

3.治療有效量的多巴胺能神經(jīng)元在制備用于治療患有脊髓損傷、 腦血管損傷、青光眼或神經(jīng)退化癥的患者的藥物組合物中的用途;

其中所述多巴胺能神經(jīng)元通過包括以下步驟的方法體外產(chǎn)生:

(1)從骨髓分離骨髓基質(zhì)細胞,和在添加了血清的標準基本培養(yǎng) 基中培養(yǎng)所述細胞;

(2)將編碼由Notch細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成的蛋白的核酸導入所述細 胞,和進一步培養(yǎng)所述細胞;

(3)在所述培養(yǎng)基中加入環(huán)腺苷酸增多劑和/或第一細胞分化刺 激因子,其中所述第一細胞分化刺激因子選自堿性成纖維細胞生長因 子,睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子及其混合物,并進一步培養(yǎng)所述細胞;

(4)在補充了血清的標準基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)步驟(3)中獲得的 細胞;和

(5)在所述培養(yǎng)基中加入神經(jīng)膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子,環(huán)腺苷酸 增多劑,堿性成纖維細胞生長因子和血小板衍生的生長因子-AA,和進 一步培養(yǎng)所述細胞以獲得所述多巴胺能神經(jīng)元,

其中所得多巴胺能神經(jīng)元是導入了所述核酸的骨髓基質(zhì)細胞的子 代。

4.治療有效量的乙酰膽堿能神經(jīng)元在制備用于治療患有脊髓損 傷、腦血管損傷、青光眼或神經(jīng)退化癥的患者的藥物組合物中的用途;

其中所述乙酰膽堿能神經(jīng)元通過包括以下步驟的方法體外產(chǎn)生:

(1)從骨髓分離骨髓基質(zhì)細胞,和在添加了血清的標準基本培養(yǎng) 基中培養(yǎng)所述細胞;

(2)將編碼由Notch細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成的蛋白的核酸導入所述細 胞,和進一步培養(yǎng)所述細胞;

(3)在所述培養(yǎng)基中加入環(huán)腺苷酸增多劑和/或第一細胞分化刺 激因子,其中所述第一細胞分化刺激因子選自堿性成纖維細胞生長因 子,睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子及其混合物,并進一步培養(yǎng)所述細胞;

(4)在補充了血清的標準基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)步驟(3)中獲得的 細胞;和

(5)在所述培養(yǎng)基中加入神經(jīng)生長因子,環(huán)腺苷酸增多劑,堿性 成纖維細胞生長因子和血小板衍生生長因子-AA,和進一步培養(yǎng)所述細 胞以獲得所述乙酰膽堿能神經(jīng)元;

其中所得乙酰膽堿能神經(jīng)元是導入了所述核酸的骨髓基質(zhì)細胞的 子代。

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