[發明專利]MATP基因的干擾靶位點序列和小干擾核酸及組合物和應用

有效

• 申請號: 200910147325.1
• 申請日: 2009-06-11
• 公開（公告）號: CN101921745A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發明（設計）人: 張鴻雁;梁子才
• 申請（專利權）人: 蘇州瑞博生物技術有限公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;A61K8/60;A61K8/92;A61Q19/00;A61Q19/02
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 王崇;王鳳桐

技術領域

本發明是關于MATP基因的干擾靶位點序列和小干擾核酸及組合物和應用，更確切地說，本發明涉及MATP基因的干擾靶位點序列，用于抑制MATP基因表達的小核酸，以及含有該小干擾核酸的化妝品組合物和該小干擾核酸在制備用于抑制黑色素生成和沉積或祛除黑色素的化妝品組合物中的應用。

背景技術

黑色素(melanin)是由黑素細胞合成的一種生物多聚體，由皮膚、毛囊、虹膜和視網膜的黑色素細胞產生，分為黑棕色的真黑素和紅黃色的褐黑素。動物與人的皮膚和毛發顏色與黑素體的數目，大小，和分布等都有直接的關系。過量的黑色素會使皮膚變黑，而非均勻分布的黑色素會導致黃褐斑和雀斑的產生。

隨著生活水平和生活質量的提高，人們對美的關注也日益增強，美白、去斑就是其中很重要的一項內容。因此，開發一種能夠抑制黑色素生成和沉積或祛除黑色素的產品稱為迫切需要解決的問題。

發明內容

本發明的第一個目的是提供MATP基因的干擾靶位點序列。

本發明的第二個目的是提供一種用于抑制MATP基因表達的小干擾核酸。

本發明的第三個目的是提供一種含有所述小干擾核酸的化妝品組合物。

本發明的第四個目的是提供所述小干擾核酸在制備用于抑制黑色素生成和沉積或祛除黑色素的化妝品組合物中的應用。

RNA干擾技術的出現為抑制黑色素生成和沉積或祛除黑色素提供了一種新的途徑。RNA干擾(RNA?interference，RNAi)是由雙鏈RNA(double-stranded?RNA，dsRNA)分子在mRNA水平關閉相應基因的表達或使該基因沉默的過程。RNA干擾技術又被形象地稱為基因敲低(knock-down)或基因沉默(gene?silencing)，是一種典型的轉錄后基因調控方法，又稱轉錄后基因沉默(post-transcriptional?gene?silencing，PTGS)。最早有關RNA干擾的報道出現在1990年，由兩個不同的研究小組同時報道了轉基因植物中的RNA干擾現象，以后又在線蟲、果蠅、斑馬魚和小鼠等幾乎所有真核生物中觀察到了RNA干擾現象。1999年，Hamilton和Baulcombe在發生RNA干擾的植物中檢測到了長度為21-25個核苷酸的RNA片段，這些RNA片斷被證明是RNA干擾所必需的，稱為小分子干擾RNA(小干擾核酸)。雙鏈小干擾核酸與細胞源性的相關酶和蛋白質形成RNA誘導的沉默復合體(RNA-induced?silencing?complex，RISC)。在RNA干擾過程中，雙鏈小干擾核酸中的正義鏈被排除出復合體，反義鏈指導RISC結合到靶mRNA的相應位點，然后由復合物中的核糖核酸酶III降解靶mRNA，從而關閉靶基因的表達。

本發明人對黑色素的合成以及沉積進行了細致的研究，發現黑色素是由多個基因相互協調并經過一系列復雜的生理生化過程合成，這些與色素沉著相關的基因參與黑色素的合成、運輸和分布。在與黑色素生成有關的一系列基因中，MATP基因是其中很重要的一個基因。

MATP(membrane-associated?transporter?protein)基因全長約40kb，含有7個外顯子和6個內含子。小鼠15號染色體上的UW基因(Underwhite?Gene)與人MATP基因同源，目前已報道多種UW基因突變，這些突變都導致小鼠眼和皮毛不同程度的色素缺乏。MATP基因變異小鼠的黑素細胞內有相對正常小鼠同樣數量的的酪氨酸酶，但其活性卻只有正常小鼠細胞的20％，黑素體內聚集的酪氨酸酶也比正常細胞少，這直接影響到黑素體中黑色素的合成。UW突變等位基因所致的色素缺乏說明其編碼的蛋白對哺乳動物色素沉著起決定性作用。

MATP基因編碼由530個氨基酸殘基構成的蛋白，該蛋白是一種為黑素瘤反應性T細胞(melanoma-reactive?T-cells)所識別的抗原。

MATP蛋白為跨膜蛋白，其結構與轉運蛋白相似，分子量約58kDa，含有12個跨膜區，在多數黑色素細胞系中表達。MATP蛋白具有運載包括酪氨酸酶在內的其他分子出入黑素細胞膜的功能。

MATP基因與色素沉著有密切的關系，其編碼的MATP蛋白對哺乳動物色素沉著起決定性作用，因此，通過RNA干擾而專一性地抑制MATP基因的表達，從而沉默MATP基因的活性，是抑制黑色素合成、改善皮膚顏色的有效途徑。

本發明提供了MATP基因的干擾靶位點序列，其中，該靶序列具有如SEQ?ID?Nos：2-10中之一所示的核苷酸序列。