[發明專利]一種高產量的結冷膠發酵制備方法

無效

• 申請號: 200910143906.8
• 申請日: 2009-06-03
• 公開（公告）號: CN101586135A
• 公開（公告）日: 2009-11-25
• 發明（設計）人: 楊寶毅;吳榮明;潘小玉;陳梅;倪井廣
• 申請（專利權）人: 浙江中肯生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種高產量的結冷膠發酵制備方法，其包括以下步驟：

1)斜面菌種經擴大培養成搖瓶種子液；

2)將搖瓶種子液接入一級種子罐無菌培養基中擴大培養；

3)將一級種子罐中的種子液接入二級種子罐無菌培養基中擴大培養；

4)將二級種子罐中的種子液接入三級發酵罐無菌培養基中發酵培養；

5)收集結冷膠發酵液；

其中所述菌種為少動鞘氨醇單胞菌，并且在三級發酵罐中的培養過程中添加無菌水。

2.權利要求1的制備方法，其特征在于，搖瓶培養基的組成為：蛋白胨：0.3～0.6，牛肉膏0.2～0.4，酵母膏0.05～0.15，其余為水。

3.權利要求1的制備方法，其特征在于，搖瓶擴大培養的條件為：溫度28-34℃，周期18～30h，搖床轉速：150r/min。

4.權利要求1的制備方法，其特征在于，一級種子罐中的培養基組成為：酵母浸出汁：0.2～0.5，牛肉膏：0.3，魚蛋白胨：0.5，DDFS-303：0.0003，其余為水；以重量/體積百分比計。

5.權利要求1的制備方法，其特征在于，一級種子罐中擴大培養的條件為：培養溫度：28～34℃，通風比：1∶0.5，運行壓力：0.05～0.08Mpa。

6.權利要求1的制備方法，其特征在于，一級種子罐擴大培養的終點為：周期：13～16h，pH值在8.2以上，氨基氮在350mg/Kg以上，OD520nm值0.1±0.02。

7.權利要求1的制備方法，其特征在于，二級種子罐中的培養基組成為：白糖：2.0～3.0，酵母浸出汁：0.1～0.3，大豆蛋白粉：0.2～0.4，KH₂PO₄：0.05，K₂PHO₄：0.05，MgSO₄：0.06，DDFS-303：0.0003，其余為水。

8.權利要求1的制備方法，其特征在于，二級種子罐的培養條件為：培養溫度：28～34℃，通風比：1∶0.5，運行壓力：0.05～0.08Mpa。

9.權利要求1的制備方法，其特征在于，二級種子罐擴大培養的終點為：周期：6～8h，pH值在6.0～6.6，氨基氮在40～80mg/Kg之間，OD520nm值0.4±0.02。

10.權利要求1的制備方法，其特征在于三級發酵罐中的培養基組成為：白糖：2.5～3.5，大豆蛋白粉：0.5～0.8，KH₂PO₄：0.1，MnSO₄·H₂O：0.025，K₂HPO₄：0.15，MgSO₄：0.06，DDFS-303：0.0003，H₃BO₃：0.003，其余為水。